Technika stanovenia krvnej skupiny podľa systému avo

Systém krvných skupín ABO sa skladá z dvoch skupín agglutinogénov - A a B a dvoch zodpovedajúcich plazmatických aglutinínov - alfa (anti-A) a beta (anti-B). Rôzne kombinácie týchto antigénov a protilátok tvoria štyri krvné skupiny: skupina 0 (1) - oba antigény chýbajú; skupina A (II) - v červených krvinkách je prítomný iba antigén A; skupina B (III) - v erytrocytoch je prítomný iba antigén B; skupina AB (IV) - antigény A a B sú prítomné na červených krvinkách.

Jedinečnosť systému ABO spočíva v skutočnosti, že v plazme neimunizovaných ľudí sú na červených krvinkách prirodzené protilátky proti antigénu: u jedincov zo skupiny 0 (1) protilátky proti A a B; u jedincov skupiny A (II) - anti-B protilátky; u osôb skupiny B (III) - anti-A protilátky; jednotlivci skupiny AB (IV) nemajú protilátky proti antigénom systému ABO.

V nasledujúcom texte sa budú anti-A a anti-B protilátky označovať ako anti-A a anti-B.

Stanovenie krvnej skupiny ABO sa vykonáva identifikáciou špecifických antigénov a protilátok (dvojitá alebo krížová reakcia). Anti-A a anti-B sa detegujú v krvnom sére pomocou štandardných červených krviniek A (II) a B (III). Prítomnosť alebo neprítomnosť antigénov A a B na červených krvinkách sa stanoví pomocou monoklonálnych alebo polyklonálnych protilátok (štandardné hemaglutinačné séra) zodpovedajúcej špecificity.

Stanovenie krvného typu sa vykonáva dvakrát: počiatočná štúdia je v liečebnom oddelení (tím pre prípravu krvi); potvrdzujúci výskum - v laboratóriu. Algoritmus na vykonávanie imunohematologických laboratórnych testov na transfúziu krvi je uvedený na obr. 18.1.

Výsledok stanovenia krvnej skupiny sa zaznamená v pravom hornom rohu predného listu lekárskej anamnézy alebo v denníku darcu (karta) s uvedením dátumu a podpisom lekára, ktorý určil.

Na severozápade Ruska je rozdelenie krvných skupín systému ABO v populácii takéto: skupina 0 (I) - 35%; skupina A (II) - 35 - 40%; skupina B (III) - 15 až 20%; skupina AB (IV) - 5-10%.

Je potrebné poznamenať, že existujú rôzne typy (slabé varianty) antigénu A (vo väčšej miere) aj antigénu B. Najbežnejšie typy antigénu A - A1 a A2. Prevalencia antigénu A1 u jednotlivcov skupín A (II) a AB (IV) je 80% a antigén A2 - asi 20%. Vzorky krvi s a2 môže obsahovať anti-A1-protilátky [2% v krvnej skupine A2(II) a 30% v skupine A2V (IV)], interakcia so štandardnými červenými krvinkami skupiny A (II). Prítomnosť anti-A1 detegované krížovým stanovením krvných skupín a pri vykonávaní testov individuálnej kompatibility.

Na diferencované stanovenie variantov antigénu A (A1 a A2) je potrebné použiť špecifické činidlá (fytohemaglutiníny alebo anti-A monoklonálne protilátky1. Pacienti skupiny A2(II) a A2V bode (IV) musia byť transfekované hemokomponenty skupiny A obsahujúce erytrocyty2(II) a A2V (iv). Môžu sa tiež odporučiť transfúzie premytých červených krviniek: 0 (I) - pre pacientov s krvnou skupinou A2(II); 0 (I) a B (III) - pre pacientov s krvnou skupinou A2V (II).

Tabuľka 18.4. Výsledky stanovenia krvného typu ABO
Výsledky výskumuTestujte krvnú skupinu
červené krvinky s činidlomsérum (plazma) so štandardnými červenými krvinkami
Anti-ABanti-Aanti-b0 (I)A (II)V (III)
----++0 (I)
++---+A (II)
+-+-+-V (III)
+++---AB (IV)
Označenia: + - prítomnosť aglutinácie, - - absencia aglutinácie

Stanovenie príslušnosti k krvným skupinám podľa systému ABO

Krvné skupiny sa určujú štandardnými sérami (jednoduchá reakcia) a štandardnými červenými krvinkami (dvojitá alebo krížová reakcia)..

Krvná skupina sa stanoví jednoduchou reakciou s dvoma sériami štandardných izohemaglutinačných sér..

    Postup definície [ukázať].

Krvná skupina sa stanoví na tabletách pri dobrom svetle a pri teplote + 15 až + 25 ° C. 0 (1) je napísané na ľavej strane tablety, A (II) v strede a B (III) na pravej strane. V strede horného okraja tablety sa uvádza priezvisko darcu alebo počet testovaných krvi. Použite aktívne štandardné sérum z troch skupín (O, A, B) s titrom najmenej 1:32, dve série. Sérum je umiestnené v špeciálnych stojanoch v dvoch radoch. Každé sérum zodpovedá označenej pipete. Na ďalšiu kontrolu použite skupinu séra AB (IV)..

Na tabletu sa aplikuje jedna alebo dve kvapky štandardného séra v dvoch radoch: sérum zo skupiny 0 (1) vľavo, sérum zo skupiny A (II) v strede, sérum zo skupiny B (III) vpravo..

Kvapky krvi z prstu alebo skúmavky sa aplikujú pipetou alebo sklenenou tyčinkou blízko každej kvapky séra a zmiešajú sa s paličkou. Množstvo krvi by malo byť 8 až 10 krát menšie ako sérum. Doštička alebo tableta sa po premiešaní jemne kolísa v rukách, čo prispieva k rýchlejšej a čistejšej aglutinácii červených krviniek. Keď dôjde k aglutinácii, ale nie skôr ako po 3 minútach, pridajte jednu kvapku 0,9% roztoku chloridu sodného do kvapiek séra s červenými krvinkami, ak došlo k aglutinácii, a pokračujte v monitorovaní až do uplynutia 5 minút. Po 5 minútach odčítajte reakciu v prechádzajúcom svetle.

Ak je aglutinácia fuzzy, pridá sa do zmesi séra a krvi dodatočne jedna kvapka 0,9% roztoku chloridu sodného a potom sa urobí záver o skupinovej príslušnosti (tabuľka 18.4)..

  1. Neprítomnosť aglutinácie vo všetkých troch kvapkách naznačuje, že v testovanej krvi nie je aglutinogén, to znamená, že krv patrí do skupiny 0 (I)..
  2. Nástup aglutinácie v kvapkách so sérami 0 (I) a B (III) naznačuje, že v krvi je aglutinogén A, to znamená, že krv patrí do skupiny A (II)..
  3. Prítomnosť aglutinácie v kvapkách so sérom skupiny 0 (I) a A (II) naznačuje, že v testovanej krvi je aglutinogén B, to znamená krv skupiny B (III)..
  4. Aglutinácia vo všetkých troch kvapkách naznačuje prítomnosť aglutinogénov A a B v testovanej krvi, to znamená, že krv patrí do skupiny AB (IV). Avšak v tomto prípade, vzhľadom na to, že aglutinácia so všetkými sérami je možná v dôsledku nešpecifickej reakcie, je potrebné naniesť na tabletu alebo doštičku dve alebo tri kvapky štandardného séra skupiny AB (IV) a pridať k nim 1 kvapku testovanej krvi. Sérum a krv sa zmiešajú a výsledok reakcie sa sleduje 5 minút.

Ak nedôjde k aglutinácii, potom sa testovaná krv zaradí do skupiny AB (IV). Ak sa objaví aglutinácia so sérom skupiny AB (IV), potom je reakcia nešpecifická. V prípade slabej aglutinácie a vo všetkých pochybných prípadoch sa krv znova kontroluje pomocou štandardných sérov iných sérií.

Stanovenie krvného typu ABO dvojitou reakciou
(pre štandardné séra a štandardné červené krvinky)

Štandardné červené krvinky sú 10 - 20% suspenzia čerstvých natívnych červených krviniek (alebo testovaných buniek premytých konzervačným prostriedkom) skupiny 0 (I), A (II) a B (III) v 0,9% roztoku chloridu sodného alebo roztoku citranu a fyziologického roztoku. Natívne štandardné červené krvinky sa môžu používať počas 2 až 3 dní za predpokladu, že sa uchovávajú v izotonickom soľnom roztoku pri teplote + 4 ° C. Konzervované štandardné červené krvinky sa skladujú pri teplote + 4 ° C počas 2 mesiacov a pred použitím sa z konzervačného roztoku umyjú.

Ampulky alebo injekčné liekovky so štandardnými sérami a štandardnými červenými krvinkami sa umiestnia do špeciálnych stojanov so zodpovedajúcim označením. Na prácu s písacími činidlami používajte suché čisté pipety, osobitne pre každé činidlo. Na umývanie sklenených (plastových) tyčiniek a pipiet sa pripravujú poháre s 0,9% roztokom chloridu sodného.

Na stanovenie skupiny odoberte 3-5 ml krvi do skúmavky bez stabilizátora. Krv by mala stáť 1,5 až 2 hodiny pri teplote +15 až 25 ° C.

    Postup definície [ukázať].

Na tabletu sa aplikujú dve kvapky (0,1 ml) štandardných sérových skupín 0 (I), A (II), B (III) z dvoch sérií. Každá skupina séra má teda jednu malú kvapku (0,01 ml) štandardných červených krviniek skupín 0 (I), A (II), B (III). Jedna kvapka testovanej krvi sa pridá k štandardným sérom a dve kvapky testovaného séra k štandardným erytrocytom. Množstvo krvi by malo byť 8 až 10 krát menšie ako sérum. Kvapky sa zmiešajú so sklenenou tyčinkou a trepaním tablety v rukách počas 5 minút sa sleduje začiatok aglutinácie. Ak je aglutinácia fuzzy, pridá sa do zmesi séra a krvi dodatočne jedna kvapka 0,9% roztoku chloridu sodného (0,1 ml) a potom sa urobí záver o skupinovej príslušnosti (tabuľka 18.4)..

  1. Prítomnosť aglutinácie pomocou štandardných červených krviniek A a B a absencia aglutinácie v troch štandardných sérach dvoch sérií naznačuje, že aglutiníny, alfa a beta, sú prítomné v testovanom sére a v študovaných červených krvinkách nie sú žiadne aglutinogény, to znamená, že krv patrí do skupiny 0 (I)..
  2. Prítomnosť aglutinácie so štandardnými sérami skupín 0 (I), B (III) a štandardnými erytrocytmi skupiny B (III) naznačuje, že v skúmaných červených krvinkách je aglutinogén A a v testovanom sére aglutinín beta. Preto krv patrí do skupiny A (II).
  3. Prítomnosť aglutinácie so štandardnými sérami skupín 0 (I), A (II) a štandardnými erytrocytmi skupiny A (II) naznačuje, že v skúmaných červených krvinkách je aglutinogén B a v testovanom sére aglutinín alfa. Preto krv patrí do skupiny B (III).
  4. Prítomnosť aglutinácie so všetkými štandardnými sérami a neprítomnosť aglutinácie so všetkými štandardnými červenými krvinkami naznačuje, že obidva aglutiníny sú prítomné v študovaných červených krvinkách, t.j. krv patrí do skupiny AB (IV)..

Stanovenie príslušnosti k krvným skupinám
použitím cyklónov anti-A a anti-B

Protilátky anti-A a anti-B (monoklonálne protilátky proti antigénom A a B) sú určené na stanovenie krvnej skupiny ľudského systému ABO namiesto štandardných izohemaglutinačných sér. Na každé stanovenie krvného typu sa použije jedna séria reagencií anti-A a anti-B..

    Postup definície [ukázať].

Jedna veľká kvapka cyklonických cyklónov anti-A a anti-B (0,1 ml) sa aplikuje na tabletu (platňu) pod príslušnými nápismi: „Anti-A“ alebo „Anti-B“. Jedna malá kvapka testovanej krvi sa umiestni vedľa seba (pomer reagencie v krvi je 1:10), potom sa činidlo a krv zmiešajú a priebeh reakcie sa pozoruje, keď sa tableta alebo platňa mierne kolísa..

K aglutinácii s cyklonickými klonmi anti-A a anti-B obvykle dochádza v prvých 5-10 s. Pozorovanie by sa malo vykonať 2,5 minúty kvôli možnosti neskoršieho začiatku aglutinácie s červenými krvinkami obsahujúcimi slabé odrody antigénov A alebo B.

Ak existuje podozrenie na spontánnu aglutináciu u osôb s krvnou skupinou AB (IV), vykoná sa kontrolná štúdia s 0,9% roztokom chloridu sodného. Reakcia musí byť negatívna..

Koliky anti-A (ružové) a anti-B (modré) sú dostupné v natívnej aj lyofilizovanej forme v ampulkách s dávkami 20, 50, 100 a 200 s rozpúšťadlom pripojeným ku každej ampulke, 2, 5, 10, 20 ml, v danom poradí.

Ďalšou kontrolou správneho stanovenia krvnej skupiny ABO pomocou anti-A a anti-B činidiel je monoklonálne činidlo anti-AB (hematológ, Moskva). Odporúča sa používať anti-AB činidlo súbežne s imunitnými polyklonálnymi sérami a monoklonálnymi činidlami. V dôsledku reakcie s anti-AB činidlom sa vyvíja aglutinácia erytrocytov skupín A (II), B (III) a AB (IV); červené krvinky skupiny 0 (I) nemajú aglutináciu.

CHYBY V URČENÍ PRÍSLUŠENSTVA SKUPINY

Chyby pri určovaní krvných skupín môžu závisieť od troch dôvodov:

  1. technické;
  2. menejcennosť štandardných sér a štandardných červených krviniek;
  3. biologické vlastnosti testovanej krvi.

Chyby z technických dôvodov zahŕňajú:

  • a) nesprávne umiestnenie séra na tablete;
  • b) nesprávne kvantitatívne pomery séra a červených krviniek;
  • c) použitie nedostatočne čistých tabliet a iných predmetov prichádzajúcich do styku s krvou. Každé sérum by malo mať samostatnú pipetu; na premývanie pipiet sa má použiť iba 0,9% roztok chloridu sodného;
  • d) nesprávny záznam testovanej krvi;
  • e) nedodržanie času stanoveného pre aglutinačnú reakciu; v zhone, ak sa reakcia berie do úvahy pred uplynutím 5 minút, nemusí dôjsť k aglutinácii, ak sú v testovanej krvi slabé aglutinogény; ak je reakcia preexponovaná dlhšie ako 5 minút, môže dôjsť k vysušeniu kvapiek z okrajov, čo simuluje aglutináciu, čo tiež vedie k chybnému záveru;
  • f) nedostatočná aglutinácia v dôsledku vysokej (nad 25 ° C) teploty okolia. Aby sa predišlo tejto chybe, odporúča sa používať špeciálne pripravené sérum na prácu v horúcom podnebí; na stanovenie krvných skupín na doštičke alebo plastovej miske, ktorej vonkajší povrch je ponorený do studenej vody.
  • g) nesprávna centrifugácia: nedostatočné môže viesť k falošne negatívnym výsledkom a nadmerné môže viesť k falošne pozitívnym výsledkom.

Chyby, ktoré závisia od použitia chybných štandardných sér a štandardných červených krviniek:

  • a) slabé štandardné séra s titrom nižším ako 1:32 alebo s uplynutou dobou použiteľnosti môžu spôsobiť oneskorenú a slabú aglutináciu;
  • b) použitie nevhodných štandardných sér alebo červených krviniek, ktoré boli pripravené nesterilné a nedostatočne konzervované, vedie k výskytu nešpecifickej „bakteriálnej“ aglutinácie.

Chyby, ktoré závisia od biologických vlastností testovanej krvi:

Chyby, ktoré závisia od biologických vlastností skúmaných červených krviniek:

    a) neskorá a slabá aglutinácia sa vysvetľuje „slabými“ formami antigénov, erytrocytmi, častejšie v dôsledku prítomnosti slabého aglutinogénu A v skupinách A a AB.2. V tomto prípade, v prípade stanovenia krvnej skupiny bez vyšetrenia séra na prítomnosť aglutinínov (jednoduchá reakcia), sa môžu vyskytnúť chyby, kvôli ktorým krv skupiny A2B je definovaná ako skupina B (III) a krv A2 - ako skupina 0 (I). Preto, aby sa predišlo chybám, musí sa stanovovať krvná skupina darcov aj príjemcov pomocou štandardných červených krviniek (dvojitá alebo krížová reakcia). Na identifikáciu aglutinogénu A2 odporúča sa zopakovať štúdiu s inými typmi (sériami) reagencií s použitím rôznych laboratórnych sklenených nádob so zvýšením doby záznamu reakcií..

Špecifické činidlá na zjemnenie krvných skupín v prítomnosti slabých variantov antigénu A (A1, A2, A3) metódou priamej aglutinačnej reakcie je tsikolikon anti-Acl a činidlo anti-A).

b) „panaglutinácia“ alebo „autoaglutinácia“, to znamená schopnosť krvi poskytnúť rovnakú nešpecifickú aglutináciu so všetkými sérami a dokonca aj so svojimi vlastnými. Po 5 minútach intenzita takejto reakcie klesá, zatiaľ čo skutočná aglutinácia sa zosilňuje. Najčastejšie sa vyskytuje u hematologických, onkologických pacientov, kalcinovaných atď. Na kontrolu sa odporúča vyhodnotiť, či sa testované červené krvinky aglutinujú v štandardnom sére skupiny AB (IV) a fyziologickom roztoku..

Krvná skupina s „panaglutináciou“ sa môže stanoviť po trojnásobnom premytí červených krviniek. Aby sa vylúčila nešpecifická aglutinácia, tableta sa umiestni na 5 minút do termostatu pri teplote + 37 ° C, po ktorom nešpecifická aglutinácia zmizne a skutočná zostáva. Odporúča sa opakovať stanovenie pomocou monoklonálnych protilátok, Coombsov test.

V prípade, že premytie červených krviniek neprináša požadovaný výsledok, je potrebné znovu odobrať vzorku krvi do predhriatej skúmavky, umiestniť vzorku do tepelnej nádoby, aby sa udržala teplota + 37 ° C, a doručiť ju do laboratória na výskum. Stanovenie krvnej skupiny sa musí vykonať pri teplote + 37 ° C, pri ktorej sa používajú predhriate činidlá, fyziologický roztok a tableta.

  • c) červené krvinky testovanej krvi sa zložia do „stĺpcov s mincami“, ktoré sa dajú makroskopicky zameniť za aglutináty. Pridanie 1 - 2 kvapiek izotonického roztoku chloridu sodného, ​​po ktorom nasleduje jemné kolísanie tablety, spravidla ničí „stĺpce s mincami“..
  • d) zmiešaná alebo neúplná aglutinácia: aglutinuje časť červených krviniek a časť zostáva voľná. Pozoruje sa u pacientov skupín A (II), B (III) a AB (IV) po transplantácii kostnej drene alebo počas prvých troch mesiacov po transfúzii krvi skupiny 0 (I). Heterogenita erytrocytov v periférnej krvi je jednoznačne overená v gélovom teste DiaMed.
  • Chyby v závislosti od biologických vlastností testovaného séra:

    • a) detekcia protilátok odlišnej špecificity počas rutinného testovania je výsledkom predchádzajúcej senzibilizácie. Je vhodné určiť špecifickosť protilátok a vybrať typizované červené krvinky bez antigénu, na ktorý sa imunizácia deteguje. Imunizovaný príjemca je povinný individuálne vybrať kompatibilnú darcovskú krv;
    • b) pri zisťovaní tvorby „stĺpcov mincí“ štandardných červených krviniek v prítomnosti testovaného séra sa odporúča potvrdiť abnormálny výsledok pomocou štandardných červených krviniek skupiny 0 (I). Na rozlíšenie medzi „stĺpcami s mincami“ a skutočnými aglutinátmi sa pridajú 1 až 2 kvapky roztoku izotonického chloridu sodného a tableta sa pretrepe, zatiaľ čo „kolóny s mincami“ sa zničia;
    • c) neprítomnosť anti-A alebo anti-B protilátok. Možno u novorodencov a pacientov s inhibíciou humorálnej imunity;
    • d) aglutinácia štandardných červených krviniek, vrátane skupiny 0 (I) v prítomnosti testovaného séra, je spojená s prítomnosťou špecifických a nešpecifických protilátok proti chladu. Zmiznutie aglutinácie počas štúdie pri teplote + 37 ° C potvrdzuje nešpecifické studené aglutiníny. Ak testované sérum interaguje s niektorými vzorkami červených krviniek skupiny 0 (I), naznačuje to prítomnosť špecifických studených protilátok v sére. Aby sa stanovila špecifickosť protilátok, testovanie sa vykonáva s panelom červených krviniek typizovaných P, MNS atď..

    Page 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 celkom stránok: 10
    1. Imunologický výber darcu a príjemcu počas transfúzie krvi, jej zložiek a transplantácií kostnej drene / Comp. Shabalin V.N., Serova L.D., Bushmarina T.D. a kol. - Leningrad, 1979-29 s.
    2. Kaleko S.P., Serebryanaya N. B., Ignatovich G.P. et al. Allosenzibilizácia počas hemokomponentnej terapie a optimalizácia výberu histokompatibilných párov darcov-príjemcov vo vojenských zdravotníckych zariadeniach / metodických. odporúčania.- Petrohrad, 1994.- 16 s.
    3. Practical Transfusiology / Ed. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. a kol. - Moskva: Triad-T, 1996. - 435 s..
    4. Sprievodca vojenskou transfuziológiou / Ed. E.A. Nechaev. - Moskva, 1991. - 280 s.
    5. Sprievodca transfúznym liekom / Ed. E.P. Swedentsova. - Kirov, 1999.- 716s.
    6. Rumyantsev A.G., Agranenko V.A. Klinická transfuziológia - M.: GEOTAR MEDICINE, 1997.- 575 s..
    7. Shevchenko Yu.L., Zhiburt EB, Bezpečná krvná transfúzia: Sprievodca pre lekárov. - Petrohrad: Peter, 2000.- 320 s..
    8. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryany N.B. Imunologická a infekčná bezpečnosť hemokomponentnej terapie. - SPb: Nauka, 1998. 232 s..
    9. Schiffman F.J. Patofyziológia krvi / Per. z angličtiny.- M.- SPb.: Vydavateľstvo BINOM - Nevsky dialekt, 2000.- 448 s..
    10. Krvná transfúzia v Clinical Medicine / Ed. P. L. Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oxford, 1988.- 1233 s..

    Zdroj: Diagnostika lekárskych laboratórií, programy a algoritmy. Ed. prof. Karpishchenko A.I., Petrohrad, Intermedica, 2001

    Metóda stanovenia krvnej skupiny systému ABO

    Krvný typ sa stanoví v dobre osvetlenej miestnosti pri teplote 15 - 25 ° C. Nižšie alebo vyššie teploty môžu skresliť výsledky štúdie. Na doštičku alebo doštičku napíšte meno a iniciály pacienta, ktorý určuje krvnú skupinu. Potom sa v kruhu alebo zľava doprava zapíšu označenia krvných skupín: O (I), A (II), B (III). Pod týmito označeniami sa príslušné séra aplikujú po kvapkách. Pre sérum každej skupiny použite samostatnú pipetu. K séru pridajte krv pacienta. Krv na určenie skupiny sa odoberá z prsta alebo ušného lalôčika. Červené krvinky, ktoré zostali v skúmavke, môžete použiť aj po zrážaní krvi a tvorbe zrazeniny. Je potrebné, aby množstvo štandardného séra bolo približne 10-krát väčšie ako množstvo pridanej krvi. Potom sa kvapky zmiešajú so samostatnými sklenenými tyčinkami a po dobu 5 minút sa pozoruje hemaglutinačná reakcia, pričom doštička alebo doštička sa jemne kýva. Aglutinácia sa prejavuje výskytom malých červených zhlukov, ktoré sa z malých postupne zhlukujú do väčších. V tomto prípade je sérum takmer úplne sfarbené. Možno, že vznik falošnej hemaglutinácie jednoduché lepenie červených krviniek. Preto sa po 3 minútach pridá jedna kvapka fyziologického roztoku do kvapiek, v ktorých došlo k aglutinácii. Ak aglutinácia pretrváva aj po 5 minútach, je to pravda.

    Interpretácia výsledkov. Pri určovaní krvnej skupiny sa môžu vyskytnúť 4 možné reakcie:

    1) aglutinácia sa nevyskytla u žiadneho zo štandardných sér; krv 1. skupiny - O (I);

    2) došlo k aglutinácii so sérami skupín I (ab) a III (a); krv druhej skupiny - A (II);

    3) došlo k aglutinácii so sérami skupín I (ab) a II (b); krv tretej skupiny - B (III);

    4) aglutinácia so všetkými tromi sérami; v tomto prípade sa vyžaduje ďalšia štúdia so štandardnými sérami AB (IV) skupiny; iba absencia aglutinácie v tejto kvapke nám umožňuje usúdiť, že ide o štvrtú krvnú skupinu - AB (IV).

    Stanovenie faktora Rh expresnou metódou (v rovine bez zahrievania)

    Na platni so zmáčateľným povrchom alebo doštičkou sú označené „sérum anti-Rhesus“ a „kontrolné sérum“. Pod nápisy sa aplikujú 1 - 2 kvapky príslušných činidiel. Do obidvoch kvapiek sa pridá testovacia krv. Na tento účel môžete použiť krv odobratú z prstu alebo červené krvinky zo spodnej časti skúmavky po vytvorení zrazeniny. Ak sa z prsta odoberie krv, pridá sa v množstve rovnajúcom sa objemu séra. Pri použití suspenzie červených krviniek sa požadované množstvo rovná polovici objemu séra.

    Krv sa zmieša so sérom pomocou suchej sklenenej tyčinky a očakáva sa aglutinačná reakcia počas 5 minút. Na zistenie falošnej aglutinácie po 3 až 4 minútach sa do každej kvapky pridá 5 až 6 kvapiek izotonického roztoku chloridu sodného..

    Výsledky stanovenia. Prítomnosť aglutinácie červených krviniek v kvapke so sérom anti-Rhesus naznačuje Rh-pozitívnu krvnú príslušnosť (Rh +). Neprítomnosť aglutinácie naznačuje Rh-negatívnu krvnú príslušnosť (Rh-). V kontrolnom sére by nemala byť aglutinácia. Ak sa objavilo, potom je toto sérum bezcenné.

    Systém ABO.

    Krvné skupiny sa určia štandardnými sérami (jednoduchá reakcia), štandardnými červenými krvinkami (dvojitá alebo krížová reakcia) a použitím cyklónov.

    Štandardné izohemaglutinačné séra. Na stanovenie skupinovej príslušnosti k krvi u ľudí sa používajú tri štandardné séra 0 (I), A (II), B (III) a menej často skupiny AB (IV). Pripravujú sa hlavne z krvi, zriedka z iných tekutín (ascitická, pleurálna exsudát). Krv sa najčastejšie odoberá darcom, môže sa použiť kadaverická alebo retroplacentálna krv. Po usadení krvi sa odoberie sérum, ku ktorému sa pridá konzervačný prostriedok - kyselina boritá v pomere 3,0 prášku na 100 ml séra, ale je lepšie ho pridať trochu viac. štandardné izohemaglutinačné sérum musí spĺňať nasledujúce požiadavky požiadavky:

    1. Do 15 - 20 s. mala by sa objaviť aglutinácia pomocou vhodných červených krviniek a po 2 minútach by mala byť jasná.

    2. Nedávajte aglutináciu s červenými krvinkami nulovej skupiny a rovnakého mena.

    3. Majte titulok aspoň 1:32.

    4. Sérum by malo byť čisté, bez dôkazov bakteriálnej kontaminácie..

    5. Každá ampulka by mala mať pas s označením skupiny, dátumom exspirácie, titrom, miestom a časom prípravy, zodpovedajúcou farbou prúžku (jeden, dva, tri, štyri)..

    Aby sa predišlo možným chybám pri určovaní krvných skupín, zafarbia sa štandardné izohemaglutinačné séra:

    Skupiny A (II) - v modrej farbe, B (III) - v ružovej farbe, AB (IV) - modré, 0 (I) - sa nezafarbujú, séra sa skladujú pri teplote +8 - 9 ° tesne uzavreté. Použite aktívne štandardné séra troch skupín (0, A, B) s titrom najmenej 1:32, dve série.

    Metodika stanovenia krvnej skupiny: krvná skupina sa stanoví pri teplote +15 až + 20 oC. na doštičkách alebo tabletách. Na ľavej strane tablety sú označené krvné skupiny v abecednej transkripcii. V strede horného okraja tablety sa uvádza priezvisko darcu (príjemcu). Použite štandardné sérum z dvoch sérií troch skupín (O, A, B) s titrom najmenej 1:32. Jedna alebo dve kvapky štandardného séra sa aplikujú na doštičku alebo tabletu v dvoch radoch, počnúc prvou skupinou zľava doprava. Kvapky krvi sa pipetujú okolo každej kvapky séra a zmiešajú sa s uhlom sklíčka. Množstvo krvi by malo byť 8 až 10 krát menšie ako sérum. Potom sa tableta jemne kýva v rukách, čo prispieva k rýchlej a čistej aglutinácii. Aglutinácia začína o 3 minúty. Keď dôjde k aglutinácii, pridá sa jedna kvapka fyziologického roztoku a pokračuje sa v nej až do uplynutia 5 minút. Výsledok sa odčíta pri prechádzajúcom dennom svetle, ak aglutinácia nie je jasná, do zmesi sa pridá jedna kvapka izotonického roztoku chloridu sodného a potom sa urobí konečný záver o skupinovej príslušnosti..

    1. Neprítomnosť aglutinácie vo všetkých troch kvapkách naznačuje, že v testovanej krvi nie sú aglutinogény, to znamená, že krv patrí do skupiny 0 (I)..

    2. Začiatok aglutinácie v kvapkách so sérom 0 (I) a B (III) naznačuje, že testovaná krv obsahuje aglutinogén A, to znamená, že krv patrí do skupiny A (II)..

    3. Prítomnosť aglutinácie v kvapkách so sérom skupiny 0 (I) a A (II) naznačuje, že testovaná krv obsahuje aglutinogén B, to znamená krv skupiny B (III)..

    4. Aglutinácia vo všetkých kvapkách naznačuje prítomnosť aglutinogénov A a B v testovanej krvi, to znamená, že krv patrí do skupiny AB (IV). Avšak v tomto prípade, vzhľadom na to, že aglutinácia so všetkými sérami je možná v dôsledku nešpecifickej reakcie, je potrebné naniesť na tabletu alebo doštičku dve alebo tri kvapky štandardného séra skupiny AB (IV) a pridať k nim 1 kvapku testovanej krvi. Sérum a krv sa zmiešajú a výsledok reakcie sa pozoruje počas 5 minút. Ak nedôjde k aglutinácii, potom sa testovaná krv zaradí do skupiny AB (IV). Ak sa objaví aglutinácia so sérom skupiny AB (IV), potom je reakcia nešpecifická.

    Stanovenie krvného typu dvojitou reakciou (podľa štandardného séra a štandardných červených krviniek).

    Táto technika umožňuje určiť prítomnosť aglutinogénov A a B v krvi, aglutiníny α a β, t. J. Určiť úplný krvný vzorec

    Stanovenie krvnej skupiny pomocou anti-A a anti-B cyklónov Anti-A a anti-B cyklóny sú produktom hybridómových bunkových línií. Sú to monoklonálne anti-A a anti-B protilátky, ktoré sú produkované dvoma rôznymi hybridómami. Cyklonické cyklóny anti-A a anti-B sú zriedené ascitické tekutiny myší obsahujúce špecifické imunoglobulíny triedy (I, G, M) namierené proti skupinovo špecifickým ľudským antigénom A alebo B.

    Chyby pri určovaní skupiny krvi.

    Môže závisieť z troch dôvodov:

    Inferiorita štandardných sér a štandardných červených krviniek;

    · Biologické vlastnosti testovanej krvi.

    Chyby z technických dôvodov:

    · Nesprávne umiestnenie séra na tablete. Namiesto aplikovaných sér zo skupiny (B) napravo sa aplikujú vľavo;

    · Nesprávny kvantitatívny pomer séra a červených krviniek;

    · Používanie nedostatočne čistých tabliet a iných predmetov pri kontakte s krvou;

    · Pre každé sérum by mala byť samostatná pipeta. Na premývanie pipiet sa má používať iba fyziologický roztok chloridu sodného;

    · Nesprávne zaznamenanie testovanej krvi;

    Nedodržanie času stanoveného pre aglutinačnú reakciu.

    Ak sa reakcia vezme do úvahy skôr, ako uplynie 5 minút, v zhone sa nemusí vyskytnúť aglutinácia, ak sú v testovanej krvi slabé aglutinogény. Ak je reakcia preexponovaná dlhšie ako 5 minút, môže dôjsť k vysušeniu kvapiek z okrajov, čo simuluje aglutináciu, čo tiež vedie k chybnému záveru..

    Chyby, ktoré závisia od použitia chybných štandardných sér a štandardných červených krviniek:

    Slabé štandardné séra s titrom nižším ako 1:32 alebo s vypršanou trvanlivosťou môžu spôsobiť oneskorenú a slabú aglutináciu;

    · Použitie nepoužitých štandardných sér a červených krviniek, porušenie sterility.

    Chyby biologických charakteristík krvi:

    Prítomnosť slabých aglutinogénov v krvi

    · Krv má vlastnosť panaglutinácie alebo autoaglutinácie, to znamená, že spôsobuje nešpecifickú aglutináciu so všetkými sérami a dokonca aj s vlastnými.

    Faktor Rh (Rh faktor).

    Rhesusov faktor prvýkrát opísali K. Landsteiner a A. Wiener v roku 1940 ako novú imunologickú vlastnosť krvi, ktorá je pre väčšinu ľudí inherentná.

    Faktor Rhesus je na červených krvinkách ľudí bez ohľadu na vek a pohlavie a nie je spojený so systémom ABO. Agglutinogén rézus, ktorý je ľudským erytrocytom spolu s aglutinogénmi A a B, nemá zodpovedajúce protilátky v sére - protilátky proti Rhesus, ako sú α alebo β, ale protilátky sa môžu vyvíjať u ľudí s Rh-negatívnou krvou pod vplyvom Rh - antigénu, ktorý sa systematicky zavádza do tela takýchto jedincov..

    To môže podliehať: transfúzia na osobu Rhesus - negatívna, Rhesus - pozitívna krv. Keď sa u tehotnej Rh negatívnej ženy vyvinie Rh, pozitívny plod.

    Faktor Rhesus je silný, tepelný antigén, pretože keď sa do tela dostanú jedinci s negatívnym dopadom na Rhesus, môže to spôsobiť produkciu špecifických protilátok proti Rh. Optimálna teplota na stanovenie Rh - aglutinogénu v červených krvinkách je 45 - 48 ° C (v Petriho miskách)..

    Stanovenie faktora Rhesus a protilátok proti Rhesus.

    Stanovenie krvného príslušenstva Rhesus - darcu sa vykonáva v dvoch fázach:

    1. Použitie štandardného univerzálneho činidla antirhesus Rhο (D). 2. Potom so štandardným univerzálnym anti-Rh'o činidlom (DC), ako aj so štandardným anti-Rh '' (OCE) sérom. Ak testovaná krv dala pozitívnu reakciu (aglutináciu) s jedným z týchto reagencií, potom sa považuje za pozitívny Rhesus..

    Technika definícieNa spodnú časť skúmavky naneste 1 kvapku štandardného činidla a 1 kvapku testovanej krvi (alebo červených krviniek). Obsah premiešajte, pretrepte a skúmavku pomaly nakláňajte horizontálne tak, aby sa obsah rozšíril cez stenu skúmavky. Potom, aby sa vylúčila nešpecifická agregácia červených krviniek, by sa do skúmavky mali pridať 2–3 ml 0,9% roztoku NaCI a miešať bez trepania dvojnásobnou až trojnásobnou inverziou. Prítomnosť aglutinácie vo forme veľkých vločiek červených krviniek na pozadí vyčerenej kvapaliny naznačuje, že Rh je krvná reakcia Rh +. Neprítomnosť aglutinácie (homogénne zafarbená kvapalina) naznačuje negatívnu krvnú reakciu (Rh-).

    Dátum pridania: 2015-08-14; počet zobrazení: 1180; OBJEDNÁVKA PÍSANIE PRÁCE

    Stanovenie krvnej skupiny podľa systému ABO - charakteristika tejto techniky

    Stanovenie krvnej skupiny v systéme ABO

    Aby sa predišlo komplikáciám pri transfúzii krvi v dôsledku aglutinačnej reakcie, je potrebné najskôr určiť ľudskú krvnú skupinu.

    Účel práce: určiť krvné skupiny v systéme ABO (pomocou cyklónov).

    Vybavenie: kolicóny, sterilné rozrývače, dve sklenené tyčinky, štandardné séra skupín I, II, III; biela dlaždica, vata, alkohol, jód, éter. Predmet štúdia - muž.

    Vykonávanie práce. Krvné skupiny sú určené vlastnosťami červených krviniek, ktoré sú stanovené pomocou štandardného séra obsahujúceho známe aglutiníny (protilátky)..

    Na dlaždicu bez miešania naneste jednu kvapku štandardného séra skupín I, II a III obsahujúcich tieto aglutiníny: I-α a β, II-β a III - α. Potom, čo dostala kvapka krvi z prstu, malé množstvo sa prenieslo do kvapky séra skupiny I s prvou sklenenou tyčinkou, druhý čistý koniec tej istej tyče sa preniesol rovnaké množstvo krvi do séra skupiny II. Použitím druhej sklenenej tyčinky sa tretia kvapka testovanej krvi prenesie do séra skupiny III. Krv sa zakaždým dôkladne premieša v kvapke séra, až kým zmes nebude rovnomerne ružovkastá. K aglutinačnej reakcii dochádza za 1-5 minút. V prípade aglutinácie stráca kvapka homogenitu a stáva sa priehľadnou a červené krvinky sa zlepia vo forme hrudiek. Krvná skupina sa stanoví v závislosti od prítomnosti alebo neprítomnosti aglutinácie.

    1. Ak vo všetkých troch kvapkách nedochádza k aglutinácii, naznačuje to neprítomnosť aglutinogénov v červených krvinkách testovanej krvi, a preto patrí do skupiny I (0)..

    2. Ak dôjde k aglutinácii so sérami skupín I a III, ktoré obsahujú agglutiníny α + β a α, potom červené krvinky testovanej krvi obsahujú aglutinogén A a táto krv patrí do skupiny II (A)..

    3. Ak došlo k aglutinácii so sérami skupín I a II obsahujúcich aglutiníny α + β a β, potom červené krvinky testovanej krvi obsahujú aglutinogén B a patria do skupiny III (B)..

    4. Ak dôjde k aglutinácii so sérami skupín I, II a III, ktoré obsahujú a + β, β a α aglutiníny, potom červené krvinky testovanej krvi obsahujú aglutinogén A aj aglutinogén B. Testovaná krv preto patrí do skupiny IV (AB)..

    Nedávno sa stanovovanie ľudských krvných skupín systému ABO vykonáva pomocou anti-A a anti-B cyklónov (monoklonálne protilátky Anti-A a Anti-B), ktoré sa používajú buď výmenou alebo paralelne s polyklonálnymi imunitnými sérami. Monoklonálne protilátky anti-A a anti-B sú produkované dvoma myšacími hybridómami a patria medzi imunoglobulíny triedy M. Cyklony sú vyrobené z ascitickej tekutiny myší anti-A a anti-B. Technológia výroby reagencií vylučuje možnosť jej kontaminácie ľudskými patogénnymi vírusmi.

    Tabuľka 1. Vyhodnotenie výsledkov stanovenia krvných skupín pomocou cyklónov

    Výsledky reakcie s tsiklonomomKrvná skupina
    Anti-aAnti-in
    --0 (1)
    +-A (II)
    -+V (III)
    ++AB (IV)

    Vykonávanie práce. Pipetujte cyklónové klony anti-A a anti-B jednotlivými pipetami do jednej veľkej kvapky. Okrem kvapiek protilátok naneste jednu malú kvapku testovanej krvi. Pozorujte priebeh reakcie s cyklónmi vizuálne s miernym vychýlením platne po dobu 3 minút. Aglutinácia červených krviniek tsiklonomom sa zvyčajne vyskytuje počas prvých 3-5 sekúnd, ale pozorovanie by sa malo vykonávať počas 3 minút kvôli oneskorenému výskytu aglutinácie červených krviniek obsahujúcich slabé odrody antigénov A alebo B. Pozitívny výsledok sa prejavuje aglutináciou červených krviniek. Ak je reakcia negatívna, kvapka zostáva rovnomerne zafarbená na červenú.

    Znamienko plus (+) označuje prítomnosť aglutinácie, znamienko mínus (-) označuje neprítomnosť aglutinácie.

    Registrácia protokolu. Zaznamenajte si, do ktorej krvnej skupiny patrí vaša krv. Zistite, ktoré krvné skupiny môžu transfúziu krvi a ktoré krvné skupiny môžete transfúziou transfúzii?

    Situačné úlohy na určenie konečnej úrovne vedomostí študentov:

    Pri dlhodobom hladovaní sa u ľudí rozvíja tzv. Hladový edém. Aky je dôvod?

    Muž jedol nekvalitné jedlo. Po chvíli má zvýšenú viskozitu krvi. Ako to možno vysvetliť?

    Krvným testom sa zistilo, že 80% hemoglobínu je fetálny hemoglobín. Kto vlastní krv?

    Pri počítaní Goryaevových buniek na veľkých štvorcoch sa našlo 580 červených krviniek. Koľko z nich je obsiahnutých v 1 ml krvi, ak sa krv v melangere odobrala po značku 0,5?

    Na 25 veľkých štvorcoch Goryaevovej bunky bolo 100 leukocytov. Koľko z nich je obsiahnutých v 1 mm 3 krvi, ak bolo napísané do melangera po značku 0,5?

    1 ml krvi obsahuje 6 ml. červené krvinky. Koľko z nich je v cirkulujúcej krvi, ak je 20% všetkej krvi v krvi? Telesná hmotnosť braná ako 80 kg.

    V dôsledku transfúzie nekompatibilnej krvnej skupiny sa zrastú červené krvinky, čo následne povedie k hemolýze. Aký typ hemolýzy?

    Prečo sú ženy zakázané pracovať vo výrobe s vysokou úrovňou vibrácií, viesť ťažké vozidlá, atď..?

    Aký je dôvod zvýšenia bilirubínu v krvi počas otravy kyselinou octovou?

    Krv otca je Rh-pozitívna, matka je Rh-negatívna, prvé tehotenstvo. Existuje riziko konfliktu Rhesus medzi matkou a plodom, ak má plod Rh pozitívnu krv?

    Otec má Rh negatívnu krv, matka Rh pozitívnu. Plod nemá faktor Rhesus. Existuje nebezpečenstvo konfliktu Rhesus medzi plodom a matkou?

    Prečo sa môže pri akútnom duševnom strese vyskytnúť akútny infarkt myokardu??

    Koagulácia krvi je komplexný viaczložkový „kaskádový“ enzymatický proces. Normálny priebeh každej predchádzajúcej fázy zabezpečuje vývoj a dokončenie každej nasledujúcej fázy. Čo sa stane v prvej, druhej a tretej fáze koagulačnej hemostázy? Čo zahŕňa postfázovú hemokoaguláciu?

    Na normálny priebeh koagulácie krvi je potrebné množstvo faktorov: protrombín, tromboplastín, AS - globulín, ionizovaný vápnik, proconvertín atď. Aký je faktor, ktorého účasť je nevyhnutná v priebehu všetkých fáz hemokoagulácie. Aký faktor poskytuje premenu rozpustného fibrínového polyméru na nerozpustný fibrín? Kde sa tvorí protrombín? Aké faktory sa podieľajú na tvorbe plazmatických a tkanivových protrombináz?

    Nenašli ste, čo ste hľadali? Použite vyhľadávanie:

    Najlepšie výroky: Študent je človek, ktorý neustále odkladá nevyhnutnosť. 10718 - | 7360 - alebo prečítať všetko.

    188.163.64.82 © studopedia.ru Nie je autorom publikovaných materiálov. Poskytuje však možnosť bezplatného použitia. Došlo k porušeniu autorských práv? Napíšte nám | spätná väzba.

    Zakázať blokovanie adBlock!
    a obnovte stránku (F5)
    veľmi potrebné

    Metódy stanovenia krvných skupín podľa systému ABO.

    Krvná skupina podľa systému ABO je určená prítomnosťou dvoch antigénov v červených krvinkách označených latinskými písmenami A a B. Antigén A je viazaný aglutinínom a, antigén B je viazaný aglutinínom ß. V ľudskej krvi sa nemôžu vyskytovať aglutinogény a aglutiníny, ktoré spolu reagujú („toho istého mena“) (v opačnom prípade by došlo k aglutinácii červených krviniek). Krv štyroch skupín má teda nasledujúce zloženie:

    Číslo skupiny a označenieAglutinogény červených krviniekAglutiníny plazmy
    I (O)žiadnya a p
    II (A)Aβ
    III (B)ATα
    IV (AB)A a bžiadny

    Na stanovenie krvnej skupiny podľa systému ABO sa použijú štandardné séra získané z krvi darcu 4 skupín a obsahujúce aglutiníny a a p v rôznych kombináciách. Jedna kvapka štandardného séra každej skupiny, ktorá bráni ich premiešaniu, sa umiestni na bielu keramickú platňu. Použitím 4 rohov skleneného podložného sklíčka sa do každej kvapky séra zavedie malé množstvo testovanej krvi (pomer objemu krvi / séra = 1 / 5-1 / 10). Krv a sérum sa miešajú 5 minút hladkým kývaním doštičky. V neprítomnosti aglutinácie zostáva kvapka rovnomerná a rovnomerne zafarbená. Počas aglutinácie sa vytvorí zrnko aglutinovaných červených krviniek. Krvná skupina je určená sérom, v ktorom došlo k aglutinácii:

    Tabuľka ukazuje, že na stanovenie krvnej skupiny sú v zásade postačujúce séra skupín II (β) a III (a), ktoré detegujú prítomnosť antigénov B a A v červených krvinkách testovanej krvi. Na kontrolu sa používa kompletná séra..

    Príklad. Pri určovaní krvnej skupiny sa pozorovala aglutinácia iba v sérach skupín II (A) a III (B), ale nie v sére skupiny I (O). To by nemalo byť, čo naznačuje technickú chybu pri určovaní krvného typu. V tomto prípade sa štúdia opakuje s použitím nových sér..

    Stanovenie faktora Rh v ľudskej krvi.

    Existuje niekoľko metód na určenie faktora Rh:

    1. Metóda konglutinácie na Petriho miskách. Pre túto štúdiu je potrebné mať okrem očných pipiet a fľaše s izotonickým roztokom chloridu sodného k dispozícii Petriho misky, vodný kúpeľ s konštantnou teplotou 46 - 48 0 С a štandardné sérum proti rhesus všetkých skupín systému ABO. Na analýzu sa odoberú dve série séra proti Rhesus, jedna skupina podľa systému ABO so študovanými červenými krvinkami:

    · 2 kvapky séra proti Rhesus sa nanášajú na Petriho misku vľavo - jedna séria vpravo - druhá v 3 radoch na 3 štúdie;

    · Do každej série pridajte kvapku červených krviniek (test, kontrola Rh-pozitívna a kontrola Rh-negatívna);

    · Po premiešaní sa Petriho miska umiestni na 10 minút do vodného kúpeľa a potom sa vyšetrí v prechádzajúcom svetle. Prítomnosť aglutinácie naznačuje pozitívny výsledok, jeho neprítomnosť znamená negatívny výsledok. Na kontrolu v tejto metóde sa samozrejme používajú Rh-negatívne a Rh-pozitívne červené krvinky..

    2. Stanovenie príslušnosti k Rhesus metódou in vitro bez zahrievania. Pri tejto metóde sa používa štandardné univerzálne činidlo, ktorým je sérum anti-D s nekompletnými protilátkami, s prídavkom 33% polyglucínu ako koloidného média:

    · Do suchej skúmavky pridajte jednu kvapku skúmaných červených krviniek a jednu kvapku univerzálneho činidla proti rhesus;

    · Obsah sa premieša pomalým otáčaním skúmavky tak, aby sa šírila cez jej steny;

    · Po 3 minútach pridajte do testovacej skúmavky 2 - 3 ml izotonického roztoku NaCl a obsah premiešajte s 2-3-násobným prevracaním skúmavky bez pretrepávania;

    · Trubica je pozorovaná na svetle. Výsledok je určený prítomnosťou alebo neprítomnosťou aglutinácie. Ak na pozadí číreho soľného roztoku existujú aglutináty vo forme hrudiek alebo vločiek z lepených červených krviniek, potom sa testovaná krv považuje za Rh pozitívnu. Pri neprítomnosti aglutinácie, rovnomernom sfarbení roztoku sa testovaná krv považuje za Rh negatívnu.

    3. Stanovenie príslušnosti k Rhesus metódou aglutinačnej reakcie v rovine s použitím cyklónov (cyklónový je soľný roztok monoklonálnych protilátok proti antigénom umiestneným na povrchu ľudských červených krviniek) anti-D super. Na tento účel použite špeciálne činidlo obsahujúce monoklonálne protilátky proti faktoru Rh (anti-D superkoliklon alebo podobné):

    · Na doštičku alebo tabletu sa nanesie veľká kvapka (asi 0,1 ml) činidla a blízko sa nachádza malá kvapka (0,02 - 0,03 ml) skúmaných červených krviniek;

    · Dôkladne premiešajte reagenciu s červenými krvinkami so sklenenou tyčinkou;

    · Po 10 - 20 sekundách doštičku jemne kývajte. Napriek skutočnosti, že k jasnej aglutinácii dochádza takmer okamžite, výsledky reakcie sa berú do úvahy 3 minúty po zmiešaní. V prípade aglutinácie je testovaná krv označená ako Rh-pozitívna, v neprítomnosti - ako Rh-negatívna.

    Dátum pridania: 2018-08-06; počet zobrazení: 369; OBJEDNÁVKA PRÁCE

    Plazmové antigény

    Plazmové (sérové) antigény sú určité komplexy aminokyselín alebo uhľohydrátov na povrchu molekúl proteínov krvnej plazmy (séra)..

    KONCEPCIA KRVNEJ SKUPINY

    BLOOD GROUP - kombinácia normálnych imunologických a genetických príznakov krvi, ktorá je dedične určená a je biologickou vlastnosťou každého jednotlivca.

    Krvné skupiny sa zdedia, vytvárajú sa po 3 až 4 mesiacoch vývoja plodu a počas života zostávajú nezmenené. Predpokladá sa, že u ľudí krvná skupina obsahuje niekoľko desiatok antigénov v rôznych kombináciách. Tieto kombinácie - krvné skupiny - môžu byť v skutočnosti niekoľko miliárd. V praxi sú totožné iba u identických dvojčiat s rovnakým genotypom..

    V praktickej medicíne výraz „krvná skupina“ spravidla odráža kombináciu erytrocytových antigénov systému ABO a faktora Rh a zodpovedajúcich protilátok v krvnom sére..

    Pre každý známy antigén sa našli protilátky s rovnakým názvom (anti-A, anti-B, anti-Rhesus, anti-Kell, atď.). Protilátky krvných skupín nie sú také konštantné vlastnosti ľudského tela ako antigény. Iba v systéme skupiny ABO sú protilátky normálnou vlastnou vlastnosťou krvnej plazmy. Tieto protilátky (aglutiníny aab) sú stále prítomné v ľudskej plazme.

    Stanovenie krvného typu Avo

    1. Krvné skupiny podľa systému avo

    Pod pojmom „kompatibilita“ sa rozumie kombinácia krvi darcu a príjemcu na antigény a protilátky, ktorá nespôsobuje imunologické interakcie.

    V závislosti od prítomnosti aglutinogénov A a B v červených krvinkách a v sére zodpovedajúcich agglutinínov aab sú všetci ľudia rozdelení do štyroch skupín:

    • Skupina O (I) - v červených krvinkách sa nenachádzajú žiadne aglutinogény, aglutiníny aab v sére.

    • Skupina A (II) - aglutinogén A v červených krvinkách, aglutinín b v sére.

    • Skupina B (III) - aglutinogén B v červených krvinkách, aglutinín a v sére.

    • Skupina AB (IV) - aglutinogény A a B v červených krvinkách, žiadne aglutiníny v sére.

    Antigén A nie je homogénny, existujú jeho dva hlavné podtypy: Podľa tohto má skupina A (II) dve podskupiny A (P) a A2 (II) a skupiny AB (IV) - AB (IV) a A2V (iv).

    Skupinový antigén B je jednotnejší, hoci sú opísané jeho zriedkavé varianty. To však nemá významný klinický význam.

    Metóda stanovenia krvných skupín

    Skupinová krvná príslušnosť podľa systému ABO sa stanoví pomocou aglutinačnej reakcie. V súčasnosti existujú tri metódy na určovanie krvných skupín podľa systému ABO:

    • pre štandardné izohemaglutinujúce séra,

    • pre štandardné izohemaglutinujúce séra a štandardné červené krvinky (prierezová metóda),

    • s použitím monoklonálnych protilátok (cyklony anti-A a aichi-B).

    V rutinnej štúdii stanoví lekársky lekár krvnú skupinu pomocou štandardných izohemaglutinačných sér alebo pomocou cyklónov, potom pošle krv do sérologického laboratória na kontrolu skupiny prierezovou metódou..

    Krvná skupina sa považuje za definovanú iba vtedy, keď laboratórium potvrdilo údaje získané nemocničným lekárom. Ak sa výsledky štúdií líšia, je potrebné zopakovať obe štúdie..

    V naliehavom prípade (keď krvácanie vyžaduje urgentnú transfúziu krvi), určí lekár nemocnicu sám skupinu (v laboratóriu je kontrola vykonaná, ale potom).

    STANOVENIE SKUPÍN KRVNÝCH ŠTANDARDOV ŠTANDARDNÝMI SEGUMEMAGGAGAGUTUTIZÁCIOU

    Najbežnejšie v klinickej a laboratórnej praxi.

    Podstatou metódy je detekcia skupinových antigénov A a B v testovanej krvi pomocou štandardných izohemaglutinačných sér. Vykonáva sa v miestnosti s dobrým osvetlením pri teplote 15 - 25 ° C.

    a) Požadované vybavenie

    • Štandardné izohemaglutinujúce séra skupín O (I), A (II), B (III) a AB (IV) z dvoch rôznych sérií. Sérum by malo byť priehľadné, bez známok rozkladu. Štandardne sú hemaglutinujúce séra rôznych skupín farebne zafarbené v určitej farbe: O (I) - bezfarebná (sivá), A (II) - modrá, B (III) - červená, AB (IV) - jasne žltá. Je potrebné poznamenať, že tieto farby sprevádzajú všetky štítky na krvných výrobkoch, ktoré majú skupinové spojenie (krv, hmotnosť erytrocytov, plazma atď.)..

    • Biele porcelánové alebo smaltované dosky alebo akékoľvek iné platne so zmáčateľným povrchom, označené 0 (1), A (P), H (W), AB (IV).

    • izotonický roztok chloridu sodného.

    • Ihly, pipety, sklenené tyčinky (sklenené podložné sklíčka).

    b) Reakčná technika

    1. Na platňu (platňu) naneste štandardné skupiny izohemaglutinujúce sérum I, II, III v objeme 0,1 ml (jedna veľká kvapka o priemere asi 1 cm). Aby sa predišlo chybám, použijú sa dve série séra každej skupiny. Celkom 6 kvapiek.

    2. Šesť kvapiek testovanej krvi približne veľkosti hlavy špendlíka 0,01 ml (malá kvapka) sa postupne prenesie suchou sklenenou tyčinkou na doštičku so 6 bodmi, každá vedľa kvapky štandardného séra (množstvo testovanej krvi by malo byť približne 10-krát menšie ako množstvo štandardného séra). ), potom sa opatrne premiešajú pomocou sklenených tyčí so zaoblenými hranami.

    3. Po premiešaní doštičky pravidelne pretrepte.

    Aglutinácia začína v priebehu prvých 10 - 30 sekúnd.

    4. Do tých kvapiek, v ktorých došlo k aglutinácii, pridajte jednu kvapku izotonického roztoku chloridu sodného a potom sa vyhodnotí výsledok reakcie..

    Pri pozitívnej reakcii sa zvyčajne v prvých 10 - 30 sekundách v zmesi objavia malé červené zrná (aglutináty) pozostávajúce z lepených červených krviniek viditeľných voľným okom..

    Ak séra všetkých troch skupín vyvolali pozitívnu reakciu, znamená to, že testovaná krv obsahuje agglutinogény - A aj B a patrí do skupiny AB (IV). V takýchto prípadoch je však potrebné vylúčiť nešpecifickú aglutinačnú reakciu (studená aglutinácia, pangglutinácia, alergia), vykonať ďalšiu kontrolnú štúdiu testovanej krvi so štandardným izohemaglutinačným sérom skupiny AB (IV), ktorý neobsahuje aglutiníny. Iba neprítomnosť aglutinácie pri tomto poklese prítomnosti aglutinácie v kvapkách obsahujúcich štandardné séra skupín 0 (1), A (II) a B (III) nám umožňuje považovať reakciu za špecifickú a priradiť testovanú krv do skupiny AB.0 (IV).

    Malo by sa poznamenať, že v prítomnosti slabého podtypu antigénu A v testovanej krvi sa aglutinačná reakcia s hemaglutinujúcimi sérami skupín 0 (1) a B (III) začína neskôr (3-4 minúty). Na presné stanovenie podtypu antigénu A je potrebná ďalšia reakcia s takzvaným anti-A činidlom.

    STANOVENIE SKUPÍN KRVNÝCH ŠTANDARDMI ISOGHEMAGLUTINIZUJÚCIM SERUM A ŠTANDARDNÉ ERYTROCYTY (METÓDA CROSS)

    Táto metóda sa najčastejšie používa v sérologických laboratóriách. Podstata metódy spočíva v stanovení prítomnosti alebo neprítomnosti antigénov skupiny A a B v skupine A pomocou štandardných izohemaglutinačných sér, ako aj skupinových protilátok a a b pomocou štandardných červených krviniek..

    • Zariadenia na reakciu so štandardnými červenými krvinkami sa líšia v tom, že na aglutinačnú reakciu sú potrebné štandardné červené krvinky troch krvných skupín: 0 (1), A (II), B (III).

    • Štandardné červené krvinky sa pripravujú z krvi darcov so známou krvnou skupinou, ktorá sa skladuje pri 4 - 8 ° C.

    Jedna veľká kvapka testovaného krvného séra zo skúmavky (0,1 ml) sa nanesie na označenú doštičku s pipetou v šiestich bunkách a vedľa nej je jedna malá kvapka (0,01 ml) štandardných červených krviniek skupín 0 (1), A (P), H (W) (každá dve série).

    Interpretácia výsledkov reakcie so štandardnými erytrocytmi spočíva v tom, že erytrocyty skupiny 0 (1) sú kontrolou (v nich nie sú prítomné žiadne antigény, čo v zásade znemožňuje špecifickú aglutinačnú reakciu s akýmkoľvek sérom)..

    STANOVENIE SKUPÍN KRVNÝCH JEDNOTLIVÝMI PROSTRIEDKAMI

    Monoklonálne protilátky sa používajú na určenie krvnej skupiny, pre ktorú sa používa hybridómová biotechnológia..

    Hybridóm je bunkový hybrid vytvorený fúziou nádorovej bunky kostnej drene (myelóm) s imunitnými lymfocytmi syntetizujúcimi špecifické monoklonálne protilátky. Hybridóm nadobúda vlastnosti obidvoch „rodičov“: schopnosť neobmedzeného rastu charakteristika nádorovej bunky a schopnosť syntetizovať protilátky vlastné imunitnému lymfocytu.

    Boli vyvinuté štandardné činidlá - monoklonálne protilátky (MAB): kolóny anti-A a anti-B, ktoré sa používajú na stanovenie aglutinogénov erytrocytov. Tsoliklon je lyofilizovaný prášok červenej (anti-A) alebo modrej (anti-B) farby, ktorý sa zriedi izotonickým roztokom chloridu sodného bezprostredne pred začiatkom štúdie..

    Cyklonické cyklóny anti-A a anti-B sa nanášajú na bielu tabletu, jednu veľkú kvapku (0,1 ml) pod príslušné značky: anti-A alebo anti-B. Okrem kvapiek protilátok sa aplikuje jedna malá kvapka (0,01 ml) testovanej krvi. Po zmiešaní zložiek sa pozoruje aglutinačná reakcia počas 2 až 3 minút.

    V roku 1940 objavili K. Landsteiner a A. S. Wiener v ľudských erytrocytoch úplne nový antigén, ktorý nazývali Rh faktor (Rh). Rhesus faktor je prítomný v krvi 85% ľudí a 15% jednotlivcov tento faktor neobsahuje. Nazýva sa to meno Macaque Rhesus, ktoré mal vždy.

    Antigény Rhesus sú klasifikované ako lipoproteíny. Sú veľmi aktívne a schopné spôsobiť tvorbu imunitných protilátok..

    Prítomnosť antigénu Rhesus sa deteguje u ľudského plodu od 5 do 8 týždňov a je dobre exprimovaná v zárodku 3-4 mesiacov..

    Stanovenie krvného typu ABO

    vybavenie:

    Dve sady štandardných séra 0 (I), A (II), B (III) skupiny dvoch rôznych sérií a jedna ampulka séra AB (IV).

    · Súprava pipiet pre každú fľašu skupiny.

    · Fľaša s izotonickým roztokom chloridu sodného s pipetou.

    · Sklenené podložné sklíčka alebo sklenené tyčinky - 8 kusov.

    · Nastavte "Rhesus" alebo pan.

    · Presýpacie hodiny na 3 minúty. a 5 min.

    · Stanovenie krvného typu sa vykonáva v miestnosti s dobrým osvetlením a teplotou 15 ° C až 25 ° C. Sérum sa uchováva v chladničke pri teplote + 4 ° C až + 10 ° C.

    3.2. Postup stanovenia krvnej skupiny:

    · Dajte na platňu v príslušnom sektore veľkú kvapku séra dvoch sérií I (O), II (A), III (B) skupín..

    · Potom v sérii pridajte pripravenú testovaciu krv do kvapiek séra rohom skleneného podložného sklíčka alebo sklenenej tyčinky a dôkladne premiešajte, kvapka krvi by mala byť 5-10 krát menšia ako kvapka séra.

    · Potom pretrepaním doštičiek dôkladne premiešajte krv so sérom.

    · Predbežné výsledky sa vyhodnotia po 3 minútach, potom sa pridá kvapka izotonického roztoku chloridu sodného, ​​znovu sa premieša a po 5 minútach.

    · Vykonajte konečné vyhodnotenie aglutinačnej reakcie (zmiešanie krvi pacienta a štandardných sér).

    · Aglutinačnú reakciu určuje lekár.

    · Výsledok reakcie sa uvedie v odporúčaní alebo sa označí na prednej strane anamnézy, kde sa uvádza dátum určenia krvnej skupiny a osobný podpis lekára a zdravotnej sestry, ktorá krvnú skupinu určila..

    · Ďalej sa do klinického laboratória pošle testovacia krv na opätovné stanovenie krvnej skupiny (aby sa zabránilo chybám) a faktora Rh.

    · Krvná skupina darcu z injekčnej liekovky je určená rovnakým systémom a overená záznamom v tejto injekčnej liekovke.

    3.3 Hodnotenie aglutinačnej reakcie:

    · Pozitívne - vločky a zrná z nalepovania červených krviniek sa pri pridávaní izotonického roztoku chloridu sodného a miešaní nerozlišujú.

    · Negatívny - kvapky séra na doštičke sú priehľadné, rovnomerne ružovej farby, neobsahujú vločky ani zrná.

    Kombinácie aglutinačných reakcií:

    · Všetky tri séra v oboch sériách nedávajú aglutináciu - testovanú krvnú skupinu 0 (I).

    Aglutinačná reakcia negatívna so skupinami séra A (II) oboch sérií a pozitívna so sérom 0 (I) a B (II) - testovaná krv skupiny A (II).

    Aglutinačná reakcia negatívna so skupinami séra B (III) v oboch sériách a pozitívna so skupinami séra 0 (I) a A (II) - skupiny s testovanou krvou B (III).

    · Skupiny séra 0 (I), A (II), B (III) dávajú pozitívnu reakciu v oboch sériách. Krv patrí do skupiny AB (IV). Predtým, ako dôjde k takémuto záveru, je potrebné uskutočniť reakciu so štandardnou skupinou AB (IV) v sére podľa toho istého postupu. Konečná aglutinačná reakcia umožňuje priradiť testovanú krv skupine AB (IV).

    3.4 Najčastejšie chyby pri určovaní skupiny krvi:

    · Slabá aktivita štandardného séra.

    Nadmerné množstvo testovanej krvi pridanej do štandardného séra.

    · Pomalá aglutinačná reakcia pri vysokej okolitej teplote.

    · Nepravdivá aglutinácia pri sušení kvapky séra a tvorba „mincových“ stĺpcov červených krviniek alebo prejav chladnej aglutinácie (teplota okolia pod 15 ° C).

    · Vo všetkých pochybných prípadoch znovu študujte príslušnosť k skupine so štandardnými sérami iných sérií.

    · Pridanie kvapky izotonického roztoku chloridu sodného do testovanej krvi a séra, ako aj vykonanie štúdií pri teplotách nad 15 ° C, aby sa zabránilo týmto chybám..

    · Skupinová príslušnosť k krvi pacienta, bez ohľadu na predtým definovanú príslušnosť, sa určuje zakaždým počas transfúzie krvi a jej zložiek..

    · Označenie skupinovej príslušnosti na základe známky v pase, výpis z anamnézy alebo iných osvedčení NIE JE POVOLENÝ.

    3.5 Pravidlá ukladania pre sérové ​​štandardné séra:

    · Skladovateľnosť séra v skupinách sa určuje na etikete fliaš a poskytuje BRSPK NIIPK pri skladovaní v chladničke (t + 4 ° С).

    · Od okamihu otvorenia sa fľaše skupinového séra môžu používať 10 dní, ak sa uchovávajú v chladničke (t + 4 °). Ak sa objavia vločky vločiek zo skupiny séra a prítomnosť zákalu, sérum sa musí vymeniť.

    3.6 Test skupinovej kompatibility:

    · Vykonáva sa so sérom pacienta.

    · Na bielu doštičku naneste 2-3 kvapky séra pacienta.

    · Pridajte 5-krát menšiu kvapku krvi darcu.

    · Krv sa pravidelne premiešava počas 5 minút, pričom sa sleduje výsledok reakcie.

    · Neprítomnosť aglutinácie darcovských erytrocytov naznačuje zlučiteľnosť darcovskej a recipientnej krvi vo vzťahu k krvným skupinám ABO..

    · Výskyt aglutinácie naznačuje ich nekompatibilitu a neprípustnosť transfúzie tejto krvi.

    · Ak pacient dostane krv z niekoľkých injekčných liekoviek, mal by sa urobiť test kompatibility s krvou z každej injekčnej liekovky, aj keď krv dostala od jedného darcu.

    3.7 Test individuálnej kompatibility (kompatibilita s Rhesus):

    · Do Petriho misky sa pridajú 2 kvapky séra pacienta a malá (0,1 ml) kvapka krvi z injekčnej liekovky (krv darcu).

    · Petriho miska sa umiestni do vodného kúpeľa - sada „Rhesus“ pri teplote vody 46-48 ° C na 10 minút.

    · Ak nedochádza k aglutinačnej reakcii, potom je krv individuálne kompatibilná a môžete vykonať test biologickej kompatibility.

    3.8 Biologická vzorka:

    · Vykonáva sa intravenóznym podaním dýzy v troch fázach s intervalom 3 minút krvi, v závislosti od veku od 2 ml do 15 ml (podľa predpisu lekára). Rýchlosť transfúzie - 5 minút. V tomto procese je pozorovaný stav pacienta.

    · Ak nie je preukázaná nekompatibilita po injekčnom podaní krvi (úzkosť, dýchavičnosť, pocit zúženia, bolesť v dolnej časti chrbta a brucha, zimnica, zvýšená srdcová frekvencia a dýchanie, znížený krvný tlak), potom sa podobný test vykoná dvakrát a potom sa transfúzia až do konca.

    · Vykonávanie všetkých týchto vzoriek sa vykonáva pod dohľadom lekára.

    Transfúzovaná krv a krvné produkty sa udržiavajú pri izbovej teplote počas 30 - 40 minút av prípade núdze sa zahrievajú na teplotu + 37 ° C vo vodnom kúpeli pod kontrolou teplomera. Transfúzia krvi a jej zložiek sa vykonáva pod dohľadom lekára. Krv, ktorá zostane v injekčnej liekovke - asi 20 ml, bez narušenia antiseptík, sa umiestni do chladničky, kde sa uchováva pri teplote + 4 ° počas 48 hodín. Ak sa u pacienta rozvinie reakcia alebo komplikácie, môže sa táto krv použiť na zistenie príčiny ich výskytu (krvná kultúra, stanovenie skupiny alebo príslušnosť k Rh, testovanie vzorky na kompatibilitu transfúznej krvi s krvou pacienta)..

    3.9 Pravidlá a podmienky skladovania krvi a jej prípravkov:

    · Všetky krvné produkty sa uchovávajú v chladničke pri teplote + 4 ° až + 6 ° C vo zvislej polohe.

    · Usadená krv by mala mať jasné vrstvenie: prvá (horná) vrstva zlatožltej farby - krvná plazma - by mala byť priehľadná; druhá vrstva šedivej farby - homogénna, tenká - vrstva bielych krviniek; tretia vrstva jednotnej tmavočervenej farby - vrstva červených krviniek.

    · Odporúča sa používať krv na transfúziu do 10 dní odo dňa zberu. maximálna trvanlivosť 21 dní.

    · Po výskyte vločiek, zrazenín, ružového zafarbenia plazmy, ako aj po uplynutí doby skladovania nie je krv vhodná na transfúziu..

    Hmota erytrocytov sa skladuje od 7 do 23 dní v závislosti od konzervačnej látky.

    Leukocytová hmota sa uchováva 48 hodín.

    · Suchá plazma sa skladuje pri izbovej teplote +20 ° C až 5 rokov.

    Čerstvo zmrazená plazma (FFP) sa uchováva v mrazničke až 6 mesiacov.

    3.10 Registrácia krvnej transfúzie a jej prípravkov:

    · Po dokončení transfúzie krvi sa v osobitnom časopise pre registráciu transfúzie zaznamená záznam, v ktorom sa uvedie dávka transfúznej krvi, jej pasové údaje, výsledky testov kompatibility, prítomnosť alebo neprítomnosť komplikácií..

    · Protokol o transfúzii krvi sa vkladá do anamnézy pacienta, kde sú uvedené vyššie uvedené položky pre transfúznu krv a jej zložky, podpísané lekárom zodpovedným za transfúziu krvi..

    3.11 Pozorovanie pacienta po transfúzii krvi:

    · Po transfúzii krvi a jej zložiek musí pacient odpočívať 3-4 hodiny.

    · Sledovanie pacienta sa vykonáva počas dňa: hodnotenie celkového stavu, správania, sťažností, vzhľadu, stavu kože, močenia.

    · Hodinu počas 3 hodín sa pacient teplomerom meria, počíta sa pulz a meria sa krvný tlak.

    · Nasledujúci deň robia všeobecný test na krv a moč.

    · Ak sa telesná teplota do 3 hodín po transfúzii s hodinovou termometriou nezvýšila, môžeme predpokladať, že na transfúziu krvi nedošlo k žiadnej reakcii..

    |nasledujúca prednáška ==>
    ZÁKLADNÉ USTANOVENIA NA STANOVENIE SKUPINOV KRVE V ABO SYSTÉME NA TRANSFÚZIU KRVINY A JEHO KOMPONENTOV|Technika umelého pľúcneho vetrania

    Dátum pridania: 2013-12-14; Pozreté: 902; Porušenie autorských práv? ;

    Váš názor je pre nás dôležitý! Bol publikovaný materiál užitočný? Áno | žiadny

    Stanovenie krvnej skupiny podľa systému ABO - charakteristika tejto techniky

    Metóda stanovenia krvnej skupiny podľa systému ABO

    Na štúdiu sú potrebné štandardné hemaglutinujúce séra I (O), II (A), III (B), IV (AB) a prvé tri varianty séra by mali byť uvedené v dvoch sériách..
    Sérum musí byť vhodné na použitie, preto je potrebné skontrolovať jeho súlad s dátumom exspirácie uvedeným na štítku séra a vizuálne určiť jeho stav. Nepoužívajte srvátku, ak je zakalená, obsahuje nečistoty, vločky, sfarbenie.
    Sérum sa považuje za vhodné na použitie, ak je priehľadné, ampulka má štítok, na ktorom sú vyznačené jej hlavné vlastnosti (séria, dátum exspirácie, skupinové zaradenie, farebné označenie podľa skupinovej príslušnosti), ampulka nie je poškodená, neotvorená.
    Potrebná je čistá doštička, ktorá sa musí rozdeliť na štyri časti, pričom sa musí zaznamenať korešpondencia s každou špecifickou krvnou skupinou, rozrývacia ihla, sterilné vatové tampóny, čistý, suchý sklenený sklíčok bez tuku, alkohol. Na doštičku sa v súlade s označením nanesie kvapka každého séra. Potom sa koža vankúšikov štvrtého prstu ľavej ruky ošetrí sterilným vatovým tampónom s alkoholom. Pomocou rozrývača prepichnú kožu a odstránia prvú vyčnievajúcu kvapku krvi (prímes alkoholu a tkanivovej tekutiny môže skresliť výsledky štúdie). Ďalšia kvapka krvi sa odoberie s rohom sklenenej podložnej sklíčka pre každú kvapku séra - s čistým rohom pohára.
    Na výskum sa do kvapky hemaglutinujúceho séra pridá kvapka krvi v pomere 10: 1. Potom sa krv opatrne otočí a trepe doštičkou. Aglutinácia sa zvyčajne zisťuje vo forme padajúcich vločiek, ktoré sú dobre vizualizované. Na objasnenie výsledku sa k kvapke pridá izotonický roztok chloridu sodného a potom sa výsledok vyhodnotí s dostatočnou spoľahlivosťou.
    Jedným z predpokladov štúdie je dodržiavanie teplotného režimu.
    Ak sa hemaglutinácia vyskytne v kvapke so sérami I (O), III (B), ale nevyskytuje sa pri sére II
    (A) a výsledok je podobný séru dvoch sér, čo znamená, že testovaná krv patrí do skupiny III (B) podľa systému ABO.
    Ak sa hemaglutinácia vyskytne v kvapke so sérami I (O), II (A), ale nevyskytuje sa pri sére III
    (B), to znamená, že testovaná krv patrí do skupiny II (A) podľa systému ABO.
    Je však tiež možná situácia, keď sa hemaglutinácia nevyskytuje u žiadneho z testovaných sér, navyše u oboch sérií. To znamená, že testovaná krv neobsahuje aglutinogény a patrí do skupiny I (O) podľa systému ABO..
    Ak dôjde ku aglutinácii so všetkými sérami oboch sérií, znamená to, že testovacie sérum obsahuje aglutinogény (A a B) a patrí do skupiny IV (AB) podľa systému ABO..

    Ako určiť krvnú skupinu osoby pomocou systému ABO, podstatu metódy a jej dôležitosť

    Ľudská krv je jedinečná tekutina, ktorá spája takmer celý svet zvierat. Je charakterizovaná a rozdelená do skupín a faktora Rh. Ako je krvná skupina určená systémom ABO? Čo je algoritmus na určenie krvného typu? Aké zariadenie sa na tento účel používa a čo je potrebné pre tento postup?

    Funkcie klasifikácie

    Aby sme pochopili, ako sú skupiny definované, je dôležité pochopiť, aké je dedičstvo krvných skupín podľa systému ABO a ako sa krvné typy líšia na molekulárnej úrovni..

    Typ krvnej tekutiny nie je ovplyvnený:

    Parametre krvných skupín sa v priebehu času nemenia a zostávajú konštantné počas celého života..

    Ľudia s rôznymi typmi krvi sa nemusia vôbec líšiť.

    Krvné skupiny sa líšia obsahom rôznych aglutinogénov - prvkov nachádzajúcich sa na červených krvinkách a aglutinínov prítomných v plazme. Zástupcovia jednej skupiny majú jeden typ aglutinogénu, zatiaľ čo druhý má iné. V niektorých typoch krvi takéto zložky vôbec nie sú..

    Aglutinogény sú dvoch typov:

    Nasledujúca tabuľka popisuje ich obsah v závislosti od skupiny:

    • prvá skupina - neexistujú žiadne aglutinogény;
    • druhá skupina obsahuje aglutinogény A;
    • tretia skupina je aglutinogény B;
    • štvrtá skupina - aglutinogény A a B súčasne.

    Zohľadnite krvnú skupinu a Rh faktor je nevyhnutný počas tehotenstva, najmä ak je žena Rh pozitívna a muž Rh negatívny. V tomto prípade dôjde k imunologickej nekompatibilite matky a plodu, v dôsledku čoho je matka zamietnutá..

    Materský organizmus na ňu reaguje ako na cudzí jav. Výsledkom je, že dieťa zomrie, narodí sa predčasne alebo dostáva hemolytické ochorenie novorodenca - stav, ktorý si vyžaduje dlhú a komplexnú liečbu. Tento jav sa vyskytuje, ak dieťa zdedilo pozitívny Rh faktor od otca a matka je Rh negatívna. Počas prvého tehotenstva sa však ne vždy vyskytuje izolimunizácia, pretože protilátky nemajú čas na vývoj.

    Ďalší faktor, ktorý berie do úvahy tých, ktorí súhlasia s transfúziou krvi. Tento postup sa niekedy odporúča tým, ktorí utrpeli ťažké krvácanie, napríklad pri poškodení veľkej tepny, otvorenej zlomenine alebo závažnej tuberkulóze..

    Poznanie vašej skupiny a Rh je dôležité pre tehotné ženy

    Darca je ten, kto daruje krv na transfúziu inej osobe. Ten, kto vezme tento biomateriál, sa nazýva príjemca. Krv s rovnakými parametrami sa považuje za vhodnú na darovanie.

    Prečo sa v štúdii nemôžete pomýliť

    Neexistuje mechanizmus kombinovania rôznych skupín. Ak sa zmiešajú kvapaliny rôznych kategórií, dôjde k aglutinácii, to znamená k procesu lepenia buniek. V takmer 100% prípadov je výsledkom smrť pacienta. V procese aglutinácie sa krv spája do zhlukov rôznych veľkostí. Cirkulácia takejto tekutiny je fatálna..

    Ľudia s prvou skupinou nemôžu odobrať inú krv ako tú istú. Vo svojom zložení nie sú žiadne aglutinogény, takže prienik týchto látok vedie k žalostným následkom.

    K aglutinácii nedochádza, keď akýkoľvek typ krvi spadá do štvrtej kategórie. Obsahuje aglutinogény A aj B. Osoba so štvrtou krvnou skupinou sa považuje za ideálneho príjemcu.

    Prečo je dôležité presne určiť faktor Rh?

    Je však dôležité nielen určiť krvnú skupinu podľa systému AB0, ale aj identifikovať faktor Rh. Čo to je?

    Faktor Rhesus je genetická vlastnosť nezávislá od človeka. Typ krvi je položený už pri počatí, je rozdelený na Rh-pozitívnu a Rh-negatívnu. S rozvojom Rhesusovho konfliktu produkuje telo matky protilátky proti biomateriálu dieťaťa a plod je odmietnutý.

    Viac informácií o tom, ako sa zdedili typy krvných tekutín a faktor Rh, nájdete na videu:

    Dôležité! Ak počas tehotenstva dôjde ku konfliktu s Rhesusom, môže to skončiť fatálne pre dieťa a spôsobiť komplikácie na zdraví ženy.

    Nezáleží na tom, či sa jedná o jednorázové tehotenstvo alebo či sa vo vnútri ženy vyvinú monozygotné dvojčatá. Proces spôsobený Rhesusovým konfliktom vždy vedie k smutným dôsledkom.

    Stanovenie krvnej skupiny podľa systému ABO je dôležité na začiatku tehotenstva. Ďalší postup je určený pre tých, ktorí riskovali transfúziu krvi..

    Rh-nekompatibilná transfúzia krvi vedie k hemolýze. Telo začína rozklad červených krviniek. V podstate je to imunitná reakcia na prienik cudzích buniek do tela..

    Hemolyzín sa uvoľňuje, to znamená látka, ktorá vyvoláva túto deštrukciu. Výsledkom je ťažká anémia. Ak je stav spôsobený transfúziou, proces najčastejšie končí fatálne.

    Hemolýza - deštrukcia červených krviniek protilátkami

    Definovanie skupín pomocou cyklónov

    Princíp stanovenia krvnej skupiny pomocou cyklonov je jednoduchý postup pomocou špeciálnych reagencií. Antigénny a aglutinínový proces je dostatočne jasný na to, aby okamžite získal spoľahlivé a komplexné informácie.

    Poradie tejto manipulácie je dôležité. Stanovenie krvnej skupiny podľa systému AB0 sa vykonáva výlučne v laboratóriu. Na zachovanie kvality reagencií a samotného biomateriálu je potrebné chladenie, ktoré sa nedá dosiahnuť doma..

    Metodika stanovenia krvnej skupiny podľa systému ABO pomocou cyklónov je príkladom modernej diagnostickej metódy a základom pre budúci výskum a objavy. Procedúru je možné vykonať u žien, ktoré očakávajú dieťa, bez ohľadu na to, aký týždeň tehotenstva práve prebieha..

    Príprava na manipuláciu

    Ako sa deje dedičnosť krvných skupín systému ABO, môžeme pochopiť, ak vykonávame podrobnú štúdiu prenosu fyziologických príznakov. Aby bola získaná krvná charakteristika presná, musia sa prísne dodržiavať všetky pravidlá jej správania. Genetik zvyčajne riadi takéto manipulácie. Štúdia je in vitro analýzou. Dešifrovanie je potrebné, vykonáva ho aj lekár.

    Aby fyziologický stav, ani dedičnosť, ani stres neovplyvnili výsledky laboratórnych testov, je dôležité prísne dodržiavať pravidlá, ako vyhovieť takejto analýze, a podmienky, za ktorých by sa mala vykonávať..

    Na správne určenie prírodného genotypu je dôležité dodržiavať tieto podmienky:

    • v kancelárii, kde sa vykonávajú činnosti s činidlom, by mala byť konštantná teplota v rozmedzí od 15 do 25 stupňov;
    • všetky komponenty použité na stanovenie systému krvných skupín by sa mali skladovať v tesne uzavretých nádobách;
    • aby štandardný výskumný postup dal jasný výsledok, laboratórny kabinet by mal byť dobre osvetlený;
    • sérum a ďalšie zložky použité v postupe by nemali obsahovať žiadne zhluky alebo byť zakalené.

    Podmienky postupu je možné dodržať iba v zdravotníckom zariadení. Je potrebné vopred pripraviť nástroje, ktoré budú potrebné na určenie typu krvného systému ABO:

    • špeciálne sklenené podložné sklíčka;
    • dva typy cyklonov;
    • dve rôzne pipety;
    • sklenené tyčinky na miešanie činidiel;
    • striekačka na manipuláciu s krvou pacienta;
    • vata;
    • sterilné obrúsky;
    • alkoholový roztok;
    • postroje na manipuláciu na žilových plavidlách.

    Je dôležité dobre sa pripraviť na laboratórne testy

    Keď sú všetky materiály a nástroje pripravené na postup, môžete k nemu pristúpiť.

    procedúra

    Transfúzna pacientka alebo tehotná žena podáva krv. Na tento účel sa odoberie približne 5 ml biomateriálu. Toto je norma pre spoľahlivé určenie skupiny.

    Potom sa na tabletu alebo na osobitnú platňu nanesie kvapka materiálu a kvapka každého činidla. Jedno činidlo je schopné aglutinácie s antigénmi obsiahnutými v druhej skupine a druhé je schopné antigénov v tretej skupine..

    Pomocou sklenenej tyčinky sa kvapka biomateriálu zmieša s každým činidlom osobitne. Činidlo, s ktorým dôjde k aglutinácii, je určujúcim faktorom krvnej skupiny. Táto nuancia má prvoradý význam..

    Takáto viacnásobná analýza sa dešifruje takto:

    • aglutinácia činidla A - druhá skupina;
    • aglutinácia činidla B - tretia skupina;
    • aglutinácia sa nevyskytla - prvá skupina;
    • aglutinácia sa vyskytla u oboch reagencií - štvrtá skupina.

    Video o takejto štúdii v laboratóriu je opísané vo videu:

    Pozorný prístup lekára vám umožní presne určiť skupinu a faktor Rh, ktorý môže hrať kľúčovú úlohu pri plánovaní a znášaní tehotenstva. Môžete tak zachrániť život a pohodu človeka a dať párom príležitosť mať deti.

    Metódy stanovenia krvných skupín, opis tabuľky

    Takmer každý človek najmenej raz za život prešiel testom na stanovenie krvnej skupiny. Metódy vykonávania tejto analýzy a ich spoľahlivosť budú diskutované neskôr..

    Aká je diagnóza??

    Krvná skupina je určitá séria antigénov umiestnených na povrchu červených krviniek, ktoré určujú ich špecifickosť. Existuje veľa takýchto antigénov, preto bola prijatá jednotná klasifikácia krvi ABO a Rh faktorom.

    Tento ukazovateľ je povinný pre pacientov pred operáciou, pre armádu, políciu a ďalšie kategórie ľudí, ktorí môžu potrebovať urgentnú transfúziu krvi.

    Štandardná testovacia metóda pre krvný typ

    Najbežnejšou výskumnou metódou pre tento ukazovateľ je metóda používajúca štandardné sérum. Táto diagnóza určuje bežné antigény podľa systému ABO..

    Isohemmaglutinujúce sérum je kombináciou špeciálnych protilátok proti vonkajším časticiam červených krviniek. Ak existuje kompatibilný antigén, na ktorý môžu protilátky pôsobiť, potom sa vytvorí komplex, ktorý podporuje vznik imunitného ochranného mechanizmu. Výsledkom je lepenie červených krviniek (aglutinácia). Ak sa tak stane, urobí sa záver o nekompatibilite krvi.

    Tieto séra sa vyrábajú z krvi darcov podľa špeciálneho systému, ktorý predpokladá extrakciu plazmy, ktorá obsahuje protilátky, po ktorej sa zriedi izotonickým roztokom chloridu sodného, ​​a to vo viacerých fázach:

    • Do nádoby sa naleje 1 ml vody, v ktorej sa rozpustí 0,9% bežnej soli.
    • Do tej istej skúmavky sa pridá rovnaké množstvo zriedenej plazmy..
    • Potom sa do nádoby s izotonickým vnesie 1 ml tejto kvapaliny.

    Tento proces umožňuje získať pomer 1: 256. Ak dôjde k porušeniu chovného postupu, existuje vysoká pravdepodobnosť dosiahnutia chybných výsledkov.

    Vykonávanie výskumu

    0,1 ml každého séra sa aplikuje na povrch tablety v oblasti, kde je nanesená požadovaná značka. Potom sa pre každú vzorku odoberie 0,01 ml testovanej krvi. A potom sa každá kvapka séra zmieša s krvou.

    O päť minút neskôr sa stanoví diagnóza. Testovanie sa považuje za pozitívne, ak aglutinačná reakcia prešla. Na základe výsledkov analýz sa zostaví tabuľka, do ktorej sa zadávajú.

    Tabuľka výsledkov krvných skupín s použitím štandardných séra.

    Technika krížovej reakcie

    V tomto prípade sa na stanovenie aglutinogénu použije cyklón. Inak štandardné séra s technológiou paralelného čistenia vďaka referenčným erytrocytom.

    Tieto dve metódy sú si navzájom veľmi podobné. Stále však existujú rozdiely.

    Na povrch, na ktorom sú predtým umiestnené rôzne séra, sa aplikuje malá kvapka bežných červených krviniek. Potom sa krv pomocou odstredivky rozdelí na frakcie. A tvarované prvky sa pridajú k štandardným sérom a plazmatická časť sa pridá k štandardným erytrocytovým bunkám. Vyhodnotenie výsledkov sa uskutoční po piatich minútach a ukazovatele sú uvedené v tabuľke.

    Vďaka tejto technike sa eliminujú výskumné chyby..

    Cyklická metóda

    Ak nie je možné určiť krvnú skupinu pomocou štandardného séra, použite túto techniku.

    Tsoliklon - hybridné protilátky, ktoré sa získavajú z myších krvných v-lymfocytov.

    Diagnostická sekvencia je nasledovná:

    1. Po označení tablety, ktorá zodpovedá typu cyklónov, sa aplikuje roztok.
    2. Jedna kvapka diagnostikovanej krvi sa pridá do každej vzorky cyklicolonu..
    3. Vyhodnotenie výsledkov do piatich minút.
    4. Pre túto techniku ​​musia byť dodržané špeciálne podmienky. Medzi ne patrí vhodnosť pre cyklóny, teplota miestnosti a úroveň vlhkosti..

    Výsledky analýz sa považujú za pozitívne, ak sa pri zmiešaní týchto frakcií pozoruje aglutinačná reakcia. Ak sa to stalo v dvoch vzorkách, potom sa predpokladá, že krv patrí do štvrtej skupiny. Pokiaľ reakcia vôbec nie je pozorovaná, potom k prvej. Diagnostické chyby v tejto technike nie sú bežné.

    Rýchla cesta „Erythrotest“

    Vyššie uvedené metódy sa v medicíne používajú už dlhú dobu a sú bežné po celom svete. Vzhľadom na to, že sa toto odvetvie neustále vyvíja, zavádzajú sa rýchle diagnostické metódy na zistenie príslušnosti k krvným skupinám. Za takúto inováciu sa považuje aj Eritrotest..

    Ak chcete týmto spôsobom určiť ukazovateľ, musíte mať nasledujúce vybavenie:

    • Päťjamková štandardná doštička
    • Skarifikátor na prepichnutie a príjem biologickej tekutiny
    • Sklenená pipeta s gumovou žiarovkou
    • Pipeta na zbieranie reagencií
    • Miešacie tyčinky

    Hlavnou výhodou erythrotestu je, že štúdia nevyžaduje ďalšie podmienky a je k dispozícii v čase, keď nie je možná štandardná diagnostika..
    sekvencie
    Do výklenkov tabliet sa umiestňujú cyklónové antigény povrchového typu a hlavné, ktoré sú zodpovedné za dedičný prenos faktora Rh. Do poslednej jamky sa pridá kontrolné sérum, ktoré vylúči chybný výsledok a správne indikuje príslušnosť k určitej skupine.

    Vyhodnotenie výsledkov analýzy sa vykonáva pomocou tabuľky, ktorá ukazuje možné výsledky testu..

    Klasifikácia ABO

    Krvný typ, jeho stanovenie sa vykonáva na základe špeciálne vyvinutých štandardov. Každá krvná skupina charakterizuje špecifickú tabuľku.

    Je Dôležité Mať Na Pamäti Dystónia

    O Nás

    Prečítajte si lekársky článok, správy, prednáška o medicíne: „Anomálie subklaviálnych tepien“, zverejnené 3 - 11-2014, 16:22, pozerané: 5 393