Imunologická imunotest s rozpisom ukazovateľov

S rozvojom príbuzných vied, ako je genetika, molekulárna biológia, chémia, ako aj s rastom technologického pokroku, sa moderná medicína môže pochváliť inovatívnymi metódami diagnostiky širokého spektra ľudských chorôb. Vyznačujú sa vysokou presnosťou výsledkov a bezpečnosťou výkonu. Jedným z týchto spôsobov identifikácie zdravotných problémov je imunosorbentový test s enzýmami. Za posledné desaťročie si získala širokú popularitu a získala si reputáciu ako vysoko účinná, spoľahlivá a pre pacienta prijateľná metóda detekcie chorôb ešte pred nástupom vonkajších príznakov. Ľahko vysvetlíme, čo je tento typ diagnózy, aký je princíp jeho činnosti, všimneme si výhody, budeme sa orientovať v nákladoch na takúto analýzu.

Reakcia tela na patogénnu flóru

Aby sa pochopilo, ako vďaka imunosorbentovému testu s enzýmami, laboratórni technici diagnostikujú rôzne choroby, je potrebné pochopiť fyziologický proces, ktorý sa vyskytuje v tele počas infekcie infekciami. Keď patogénny mikroorganizmus vstúpi do krvného riečišťa, ľudský imunitný systém vykazuje ochrannú reakciu vo forme uvoľňovania určitých látok - protilátok. Viažu sa na bunku a analyzujú, či je súčasťou tela alebo či prenikla zvonka. Ak imunitný systém zistí, že bunka je cudzia, počet protilátok sa začne zvyšovať, aby bolo možné bojovať proti patogénnym mikroorganizmom..

Protilátky prichádzajú v mnohých formách a majú svoje vlastné charakteristiky. Niektoré látky sa objavujú priamo počas obdobia infekcie, iné zostávajú počas celého života v ľudskom tele a vďaka nim sa u nich vyvinie stabilná imunita voči špecifickému ochoreniu. Proteínové štruktúry sú rozdelené do nasledujúcich typov: A, D, E, M, G. V medicíne sa protilátky nazývajú imunoglobulíny. Preto je zvyčajné označovať ukazovatele týchto látok latinskými písmenami Ig.

Enzymaticky viazaný imunosorbentový test (ELISA) je založený na údajoch z lekárskych poznatkov. Použitím špeciálnych antigénov v laboratóriu je možné určiť prítomnosť alebo neprítomnosť určitých protilátok v biologickom materiáli. Na základe výsledkov takejto analýzy môže lekár určiť diagnózu a určiť nielen prítomnosť patológie, ale aj obmedzenie jej pôvodu, aby identifikoval úroveň nebezpečenstva pre pacienta. Pri enzýmovom imunoanalýze sa najčastejšie skúma prítomnosť protilátok skupín M a G..

Čo je to IFA??

Enzýmový imunosorbentový test v skutočnosti nie je inováciou v modernej spoločnosti. Bolo vymyslené už v 80. rokoch. Ale na vykonanie takýchto štúdií bolo potrebné objemné drahé vybavenie. Preto sa táto metóda použila iba v špeciálne vybavených vedeckých laboratóriách: použila sa na typizáciu buniek a tkanív. Ale potom sa nedostal k širokej distribúcii v diagnostickej medicíne, bolo technicky náročné a extrémne drahé ho používať. Len s vývojom technológie a vynálezom biopolymérnych materiálov sa ELISA zlepšila. Potom sa metóda začala popularizovať a získala dôveru v lekárske kruhy.

Ako už bolo uvedené vyššie, táto metóda zahŕňa detekciu určitých skupín imunoglobulínov v biomateriále - krvi, plodovej vody, sklovca alebo mozgomiechového moku..

Existujú štúdie bez aplikácie antigénu na povrchový a enzýmový imunosorbentový test, ktorý zahŕňa reakciu v špeciálnych jamkách. Táto posledná uvedená metóda má veľkú citlivosť a spoľahlivosť, a preto sa v lekárskych laboratóriách vykonáva analýza s cieľom zistiť choroby ľudí..

Enzymaticky viazaný imunosorbentový test

V závislosti od údajného ochorenia sa potrebný antigén použije zo súpravy enzýmovo viazaného imunosorbentu, ktorá sa počas chemickej reakcie v prítomnosti infekcie bude viazať na patogénnu flóru. Tento proces sa nazýva imunitná reakcia..

Potom, aby sa vizuálne určil výsledok štúdie, vykonajte enzymatickú fázu ELISA. Zahŕňa to farbenie materiálu pomocou špeciálnych reagencií. V tejto štúdii sa používajú enzýmy, ako je alkalická fosfatáza, peroxidáza a avidín. V závislosti od farby získanej počas chemických reakcií sa stanoví výsledok enzýmového imunotestu.

Čo je kolorimetria??

Analýza enzymatickej fázy diagnózy sa vykonáva pomocou metódy, ktorá sa nazýva „kolorimetria“. Faktom je, že nielen farba materiálu poskytuje informácie o infekcii, ale aj hustotu farieb vyplývajúcu z chemických reakcií. Je to indikátor, ktorý určuje koncentráciu patogénneho mikroorganizmu. Ak sa manuálna metóda diagnostiky používa starým spôsobom, potom sa zostaví špeciálny kalibračný graf na určenie týchto ukazovateľov.

V moderných laboratóriách sa dnes manuálna metóda zriedka používa. Na analýzu ELISA sa používa špeciálny prístroj - kolorimeter, v ktorom sa manuálne nastavujú iba výskumné parametre a potom sa všetka práca vrátane vykreslenia vykonáva automaticky..

Metódy ELISA

Existujú priame a nepriame metódy enzýmového imunotestu. Prvý pohľad zaberie menej času, pretože má iba 3 stupne vykonávania. Najskôr sa k antigénom testovaného materiálu umiestneného v špeciálnych jamkách pridajú špecifické protilátky. Potom odstráňte ich nadbytočné množstvo a vykonajte enzymatickú fázu analýzy, čím sa získa výsledok.

Nepriama metóda sa používa oveľa častejšie, pretože má vyššiu citlivosť v porovnaní s priamou metódou diagnostiky. Pri jej vykonávaní sa používa dvojitá štúdia. Konkrétne je antigén najskôr asociovaný s neznačenou protilátkou a potom so značenou protilátkou. Tento proces vyžaduje viac času, ale výsledok je najpresnejší..

Súpravy reagencií

Enzýmové imunosorbčné testovacie súpravy vyrábajú rôzni výrobcovia v širokej škále konfigurácií. V Rusku je uznávanou spoločnosťou Zväz lekárskych a biologických. Tento výrobca vyrába súpravy reagencií pre štúdie ELISA zamerané na takmer všetky infekcie bežné v našich zemepisných šírkach, ktoré je možné týmto spôsobom analyzovať. Okrem samotných reagencií sú súčasťou súprav aj ďalšie materiály, ktoré zaisťujú bezpečnosť, pohodlie a rýchlosť analýzy. Okrem toho sú chemické látky natierané rôznymi farbami, čo znižuje pravdepodobnosť chyby pri výbere laboratórneho asistenta reagencií..

Chemicko-biologické súbory sa líšia v relatívnej prístupnosti, čo priamo ovplyvňuje distribúciu a dostupnosť enzýmového imunotestu pre populáciu.

Výhody diagnostickej metódy

Enzymatický imunotest má nepochybne v porovnaní s inými diagnostickými metódami niekoľko výhod:

  1. Pomocou neho môžete dokonca určiť nevýznamnú prítomnosť patogénnych organizmov, čo naznačuje vysokú citlivosť testu..
  2. Schopnosť odhaliť ochorenie v najskorších štádiách, čo výrazne zvyšuje šancu na úspešnú liečbu.
  3. Jednoduchosť a pohodlie pri odbere biologického materiálu. Takáto analýza sa vykonáva v súkromných aj štátnych laboratóriách. Ak je to potrebné, zdravotná sestra môže materiál odobrať pacientovi doma.
  4. Analýza si vyžaduje veľmi malé množstvo biomateriálu.
  5. Rýchly výsledok. Moderné lekárske vybavenie vám umožňuje vykonávať analýzu počas dňa.
  6. Schopnosť odhaliť latentné asymptomatické formy infekcie.
  7. Dostupnosť štúdia.
  8. Ak je to potrebné, je možné pomocou tejto metódy vykonať hromadné prieskumy..
  9. Je možné sledovať priebeh choroby a účinnosť predpísanej liečby, pretože je možné vykonať analýzu ELISA pre pacienta absolútne bezpečne..
  10. Automatizácia fáz analýzy, ktorá eliminuje ľudský faktor a zvyšuje spoľahlivosť výsledkov.
  11. Reagencie pre ELISA sa uchovávajú po dlhú dobu - asi rok.
  12. Analýza je možná s kolísaním teploty okolia..

Imunoglobulíny skupiny M

Protilátky skupiny M sú produkované imunitným systémom okamžite po detekcii cudzieho antigénu. Ak teda enzýmový imunotest skončil detekciou takýchto látok v biomateriáli, potom to znamená akútne štádium priebehu choroby, primárnu infekciu. Imunoglobulíny skupiny M môžu byť v tele až mesiac, v závislosti od typu infekcie. Potom sa ich počet zníži do úplného vymiznutia.

Imunoglobulíny skupiny G

Zdá sa, že proteínové štruktúry typu G. nahrádzajú imunoglobulíny skupiny M. Tieto látky vytvárajú stabilnú, vo väčšine prípadov celoživotnú imunitu voči chorobe. Stanovenie proteínovej štruktúry IgG v testovanom materiáli naznačuje, že telo sa predtým stretlo s patogénom a má ochrannú reakciu pred reinfekciou.

Indikácie pre diagnostiku

Na stanovenie rôznych infekčných chorôb, hormonálnych stavov a alergických testov sa používa enzýmový imunosorbčný test. Ide o:

  • stanovte hladinu hormónov štítnej žľazy;
  • ukazovatele reprodukčného hormonálneho panelu;
  • nádorové markery;
  • detegovať patogény infekčných chorôb, ako sú cytomegalovírus, hepatitída, toxoplazma, rubeola, osýpky, tuberkulóza, chlamydia, syfilis, mykoplazma, ureplazma, candida, giardia a dokonca aj HIV;
  • diagnostikujú autoimunitné ochorenia. Vrátane enzýmového imunosorbentového testu: TSH, TG, T3 a T4 sa často používajú na štúdium hormónov štítnej žľazy.

Okrem diagnostických účelov sa pri lekárskych výskumných činnostiach používa aj enzýmový imunosorbentový test.

Ako sa materiál prijíma?

Vo väčšine prípadov sa na analýzu odporúča odber žilovej krvi. Po spracovaní a príprave materiálu na štúdiu sa vykoná krvotvorné sérum alebo plazma s enzýmom spojeným imunosorbentom.

Štúdium hormonálneho panelu si vyžaduje osobitnú pozornosť, pretože v tomto prípade je mimoriadne dôležité vziať do úvahy vlastnosti príjmu materiálu. Napríklad diagnostika väčšiny hormónov v ženskom reprodukčnom systéme vyžaduje odoberanie venóznej krvi v určitých dňoch menštruačného cyklu. Vonkajšie faktory ovplyvňujú mnohé ďalšie hormóny: sezónnosť, denný čas, psychický stav pacienta a oveľa viac. Ak nezohľadníte konkrétne faktory, môžete získať falošný výsledok, ktorý povedie k zhoršeniu ochorenia alebo nesprávnemu predpísaniu liečby..

V niektorých, častejšie komplikovaných prípadoch môže byť na analýzu potrebná mozgomiešna tekutina, sklovité telo alebo plodová voda tehotnej ženy. Postupy zberu týchto biologických materiálov nesú určité riziko, majú kontraindikácie a dobu zotavenia. Preto by sa mal takýto imunosorbentový test s enzýmami vykonávať len na základe svedectva lekára a pod jeho dohľadom. Dešifrovanie v tomto prípade vyžaduje špeciálne lekárske znalosti a môže to chvíľu trvať.

Príprava analýzy

Mal by sa vykonať enzýmový imunosorbentový test pri dodržaní všetkých odporúčaní, pretože výsledky štúdie ovplyvňujú vonkajšie faktory. Napríklad je dôležité darovať venóznu krv na lačný žalúdok ráno (až 11 hodín). 2 týždne pred údajným príjmom materiálu musíte prestať užívať lieky, najmä hormóny. Niekoľko dní pred štúdiou by ste sa mali zdržať pitia alkoholu a mastných potravín a tiež vylúčiť fyzickú aktivitu, starosti a stres..

Rozdelenie výsledkov

Rozdelenie výsledkov testu s enzýmom spojeným imunosorbentom vyžaduje špeciálne znalosti o vlastnostiach proteínových štruktúr (protilátok), ktoré boli opísané vyššie (IgG a IgM). V súlade s týmito údajmi sa analyzujú výskumné ukazovatele. Tabuľka popisuje možnosti, ktoré je možné získať počas analýzy:

Imunologická imunotest: prepis
Imunoglobulíny MImunoglobulíny GÚdajné dešifrovanie
zápornezáporneTelo nikdy túto infekciu nezažilo. Neexistuje žiadny patogén ani protilátky.
zápornejednoznačneTelo si vyvinulo silnú imunitu proti infekcii..
jednoznačnezáporneAkútna forma infekcie.
jednoznačnejednoznačneNajpravdepodobnejšia primárna infekcia, sú však potrebné ďalšie diagnostické testy.

Pri analýze predloženej tabuľky možno dospieť k záveru, že vo väčšine prípadov budú potrebné ďalšie štúdie na potvrdenie diagnózy. Samotný imunosorbentový test spojený s enzýmom nemôže dať definitívnu odpoveď. Norma v tomto prípade nemá jasné hranice: zistené proteíny skupiny G naznačujú iba to, že telo bolo predtým infikované určeným patogénom. Rovnaký výsledok však môže naznačovať prítomnosť akútnej fázy - na stanovenie správnej diagnózy je dôležité porovnať veľa faktorov a ukazovateľov..

Rizikové faktory

ELISA je z 90% presná. Existujú však rizikové faktory, ktoré ovplyvňujú skreslenie diagnostického výsledku: porucha zariadenia, nesprávny zber materiálu, skladovanie a preprava, nezohľadnenie ďalších vonkajších faktorov.

Neodporúča sa diagnostikovať po transfúzii krvi, hemolýze, chirurgickom zákroku, biopsii alebo punkcii biologického materiálu - môže to ovplyvniť aj výsledky ukazovateľov..

Náklady na analýzu

Náklady na diagnostickú štúdiu majú široký rozsah a závisia od typu analýzy a antigénu, ktorý sa má určiť, pretože na základe týchto faktorov sa vypočítajú náklady na súpravy reagencií a stanoví sa zložitosť analýzy. Ale vo väčšine prípadov je imunosorbent s enzýmom spojený s mnohými pacientmi. Jeho cena je od 300 r. do 2000 r.

ELISA je cenovo dostupná, rýchla a vysoko účinná metóda na diagnostikovanie veľkého zoznamu chorôb. Iba kvalifikovaný zdravotnícky pracovník je však oprávnený výsledky dešifrovať a diagnostikovať.

Analýza ELISA - čo to je, dekódovanie enzýmovo viazaného imunosorbentového testu na parazity, syfilis, HIV, tuberkulózu. Norma v tabuľke, výsledky

Vďaka vývoju modernej medicíny sa už lekár pri stanovovaní diagnózy nemusí zameriavať na nepriame prejavy chorôb ani vykonávať viacstupňové laboratórne štúdie. Stačí vykonať jednu analýzu, ktorá potvrdí alebo vyvráti údajnú počiatočnú diagnózu..

Táto metóda je založená na enzýmovom imunosorbentovom teste (ELISA) - táto štúdia vám umožňuje zistiť konkrétne protilátky a antigény obsiahnuté v rôznych patológiách, čo výrazne urýchľuje diagnostiku.

Čo je IFA

Analýza ELISA je laboratórny test (metóda), ktorý pomáha určiť prítomnosť alebo neprítomnosť určitých protilátok v tele na boj proti vírusu a ich počet.

Základom štúdie je prirodzená reakcia antigénu (predmet škodlivý pre organizmus) - protilátky (proteín, ktorý ničí škodlivé objekty), čo umožňuje detekciu prítomnosti rôznych vírusov a baktérií..

ELISA je prirodzená imunitná reakcia tela - interakcia protilátky so zodpovedajúcim antigénom. Počas ELISA sa teda do skúmavky s materiálom pridávajú antigény alebo protilátky, po ktorých sa zistí koncentrácia výsledných komplexov antigén-protilátka..

Ak vzniknú náhody, vzniknú imunitné komplexy, potom dôjde k enzymatickej reakcii farbiacej látky s kombinovanou molekulou. Je to kvôli zmene farby počas enzymatickej indikácie, že choroba je identifikovaná po štúdiu hladiny detekovanej zlúčeniny.

Druhy imunoglobulínov

Ľudské imunoglobulíny sa rozlišujú do niekoľkých tried, ktoré sa navzájom líšia svojimi vlastnosťami, štruktúrou a antigénnymi charakteristikami ťažkých reťazcov (H-reťazce). U všetkých cicavcov, vrátane ľudí, je izolovaných päť H-reťazcov, ktoré určujú príslušnosť imunoglobulínov k zodpovedajúcej triede: G, M, A, D, E.

Každá trieda sa navzájom líši biologickými vlastnosťami a schopnosťou viazať antigény a rýchlosťou a silou svojich väzieb s molekulou..

Funkcie každého imunoglobulínu (lg) sú rôzne:

Množstvo v telefunkciePolčas rozpadu (dni)hodnota
G70%Vytvára pasívnu imunitu novorodenca;

potrebné pre imunitnú odpoveď

zlepšiť fagocytózu,

21-24poskytujú dlhodobú humorálnu imunitu pri infekčných chorobách
M5-10%potrebné na aktiváciu fagocytózy,

schopný viazať 5 molekúl antigénu,

5Poskytuje primárnu imunitnú odpoveď
A10-15Neutralizujú toxíny a vírusy

potrebné na vytvorenie skorej imunity

Vzdelávanie miestnej imunity

4-5Ochrana sliznice
E0,2%spôsobiť alergie a anafylaxiu aktivovať tkanivové bazofily2Ochrana proti parazitom
D0,2%zapojený do produkcie lymfocytov, nevyhnutný ako membránový receptor pre antigény;3Ich úloha je zle pochopená.

Výskyt imunoglobulínov sa vyskytuje v akomsi „reťazci“ - IgM IgG, takto telo reaguje na výskyt antigénu v tele. Počas laboratórnej diagnózy hodnotenie koncentrácie troch hlavných imunoglobulínov - G, M, A.

Indikácie pre imunoglobulínovú analýzu

Analýza ELISA je každým rokom čoraz obľúbenejšia..

Takáto štúdia urýchľuje diagnostiku, a to je veľmi dôležité pri liečení takých patológií, ako sú:

  • vírusová hepatitída;
  • Infekcia HIV;
  • cytomegalovírus,
  • Vírus Epstein-Barrovej,
  • herpes vírus,
  • osýpky
  • rubeola,
  • tuberkulóza,
  • salmonelóza,
  • úplavica,
  • kliešťová encefalitída,
  • Helicobacter baktérie,
  • borelióza,
  • tetanus,
  • syfilis,
  • záškrt,
  • leptospiróza,
  • chlamýdie,
  • ureaplasmosis,
  • mykoplazmózy,
  • čierny kašeľ.

Analýza tiež umožňuje určiť infekciu parazitmi:

  • flatworms
  • škrkavka
  • histologická améba,
  • pečeňové tremády,
  • lamblia,
  • Toxoplasma,
  • Trichinelle,
  • pečeňové,
  • cestodoses.

ELISA je druh markera autoimunitných patológií a zhubných nádorov.

Príprava na skúšku

Pri príprave štúdie by ste mali dodržiavať tieto pravidlá:

  • deň pred odberom krvi nemôžete fajčiť a piť alkohol,
  • nevykonávajte športové alebo iné fyzické aktivity,
  • snažte sa vyhnúť stresu,

Pred vykonaním analýzy ELISA sa musíte vyhnúť stresu.

  • prestaňte užívať drogy najneskôr 10 dní pred manipuláciou.
  • Lekári tiež odporúčajú špeciálnu diétu - vylučujte mastné a vyprážané potraviny, a ak sa štúdia vykonáva na hepatitíde, je potrebné nepoužívať žiadnu pomarančovú zeleninu a najmä citrusové plody. Darujte krv ráno na lačný žalúdok.

    Falošne pozitívna analýza je spôsobená nesplnením odporúčaní, najmä používaním tukových potravín, čo vedie k príliš vysokej koncentrácii triglyceridov v plazme, v dôsledku čoho klesá vodivosť testu ELISA..

    Postup odberu vzoriek

    Ako testovaný materiál sa môže použiť celá krv, sérum alebo venózna krvná plazma. Odber vzoriek materiálu, obvykle vykonávaný z ulnárnej žily, na tento účel sa používa jednorazová ihla a vákuová trubica, je potrebných 5 až 10 ml krvi..

    Pre presnosť výsledku je dôležité dodržiavať správnu techniku ​​odberu vzoriek - punkcia samotnej cievy a okolitých tkanív sa musí vykonať jednou manipuláciou, preto sa použije krátka ihla s veľkým priemerom, aby nedošlo k poškodeniu opačnej steny žily a aby nedošlo k poškodeniu červených krviniek..

    Aby sa zachovala integrita červených krviniek, je tiež potrebné, aby krv stekala po stenách skúmavky.

    Počas skladovania materiálu by sa malo zabrániť možnej ionizácii. Okrem toho by materiál nemal prísť do styku so zvyškami dezinfekčných prostriedkov, preto sa používa iba jednorazová plastová skúmavka s menom pacienta, dátumom a časom dodania materiálu..

    Ak je potrebné krátke uskladnenie testovaného materiálu, potom sa použije chladnička s teplotou 2-4 ° C, ak je potrebné dlhšie skladovanie, materiál sa zmrazí pri teplote -20 ° C.

    Ako sa robí analýza

    Po príprave testovaného materiálu pokračuje laboratórny asistent s potrebnými manipuláciami. Na tento účel sa používa množstvo špeciálnych antigénov, ktoré umožňujú vyvolať reakciu tela na dráždivé látky. Sú to rôzne infekcie, hormóny, alergény.

    Očakávaná schéma reakcie antigén-protilátka vyzerá takto:

    • Primárnou reakciou je detegovateľný Ig (Ab) a purifikovaný patogénny antigén (Ag)..
    • Na detekciu výsledných imunokomplexov nasleduje nová imunologická reakcia, pri ktorej špecifický špecifický Ig pôsobí ako antigén a konjugovaný Ig (Ab) preň pôsobí ako protilátka.
    • Posledným krokom je enzymatická reakcia spolu s molekulou konjugovaného katalyzátora. Substrátom je chromogén (nezafarbený), ktorý sa zafarbí v priebehu reakcie a intenzita farby určuje kvantitatívny indikátor imunoglobulínu vo vzorke..

    V súčasnosti bolo vyvinutých mnoho rôznych možností ELISA a neexistuje jasná klasifikácia. Metódy sa zvyčajne posudzujú na základe ich rozdelenia na heterogénne a homogénne - všetky fázy analýzy sa uskutočňujú pomocou tuhej fázy alebo iba pomocou roztoku..

    Moderné klinické diagnostické laboratóriá zvyčajne používajú heterogénnu (pevnú fázu) ELISA, v ktorej pevná fáza znamená absorpciu antigénov alebo protilátok na pevnom povrchu špeciálnych jamiek umiestnených na polystyrénovej mikroplatničke, metóda je rozdelená na priamu a nepriamu ELISA..

    Pri priamom teste ELISA sa zavedený antigén fixuje počas inkubačného procesu na povrchu prázdnych jamiek, preto sa študované vzorky materiálu umiestnia do čistých jamiek na 20-25 minút, čo je potrebné na pripojenie antigénu k ich povrchu. Potom sa pridajú potrebné protilátky. Ďalej materiál zostáva určitý čas na vytvorenie väzieb.

    Protilátky sa vždy pridávajú v nadbytku, takže aj keď sú prítomné, neviazané antigény zostávajú vo vzorke a ak vôbec neexistujú žiadne antigény, potom nebudú existovať žiadne väzby. Na odstránenie "extra" protilátok sa uskutoční dekantácia, po ktorej zostanú iba tie protilátky, ktoré vytvorili spojenie s antigénom..

    Potom nasleduje enzymatická reakcia - pridanie roztoku enzýmu do jamiek, potom sa získané väzby zafarbia.

    Pri nepriamom spôsobe ELISA sú použité protilátky vopred spojené so substrátom enzymatickej reakcie; v tomto prípade dôjde k asociácii protilátok s antigénom počas inkubačného procesu, po ktorom dôjde k mobilizácii väzieb na povrchu jamiek a konjugát a substrátovo-chromogénne činidlo zavedené po reakcii zafarbí reakciu.

    Hlavným rozdielom medzi nepriamou a priamou metódou teda nie je prilepenie materiálu k povrchu čistých jamiek, ale väzba na antigén imobilizovaný na tablete..

    Reakcia sa zastaví použitím špecializovaných zariadení, potom sa každá jamka podrobí fotometrickému procesu, po ktorom nasleduje porovnávací opis výsledku získaného s predtým vykonanými kontrolnými vzorkami..

    Ak sa vo vzorke zistí zvýšenie optickej hustoty, nadhodnotí sa aj koncentrácia špecifických protilátok vo výsledku testu..

    Kedy bude analýza pripravená

    Štúdia netrvá príliš dlho, od odberu krvi po dosiahnutie výsledku, trvá 1 až 10 dní, v závislosti od diagnostických opatrení..

    Výsledky skúšok a ich interpretácia

    Vo forme prijatej pacientom diagnostický výsledok naznačuje negatívny alebo pozitívny výsledok pre určité triedy imunoglobulínov, tiež označuje kvantitatívny ukazovateľ rôznych tried protilátok..

    Možné sú rôzne interpretácie výsledkov:

    1. IgM (+) (IgA, IgG neurčené) - proces hojenia;
    2. IgM (-); IgG (+), IgA (+) - chronická infekčná patológia;
    3. IgM, IgG, IgA (všetky s hodnotou) - nedostatok ochranných mechanizmov pre infekcie;
    4. IgG (+/-) a IgA (+/-), IgM (+) - akútny proces;
    5. IgM (-), IgA (-), IgG (+) - po infekčnej imunite;
    6. IgM, IgG, IgA (+) - chronická patológia v akútnom štádiu.

    Napríklad, ak boli zistené IgG a IgM, potom môže mať pacient jednu z týchto chorôb:

    • vírusová hepatitída;
    • cytomegalovírus;
    • herpes;
    • kiahne;
    • chlamýdie
    • stafylokoková alebo streptokoková infekcia.

    Na hormonálne štúdie sa často predpisuje imunosorbentový test viazaný na enzýmy, normy sú uvedené v tabuľke:

    Hormonálne menopodlahanorma
    1tyreoglobulínum / fDo 70 IU / ml
    2tyroxínm / f64 až 146 nmol / l
    3trijódtyronínm / f1,8 - 2,8 nmol / 1
    4Bez tyroxínum / f11-25 pmol / l
    5Zadarmo triodritoninm / f4,49 - 9,3 pmol / l
    6Testosterón, dehydrotestosterónF0,5 - 10 mU / l

    Analýza ELISA je diagnostická štúdia, ktorá vám umožňuje vyhodnotiť pravdepodobnosť vzniku patologických stavov rakoviny. Interpretáciu výsledkov však vykonáva iba ošetrujúci lekár.

    Hodnota výsledkov skúšky

    ELISA je vhodná na detekciu rôznych foriem genitálnych infekcií vrátane syfilis a často sa používa na skríning tehotných žien..

    Vďaka tejto štúdii môžete zistiť, ako dlho sa infekcia a štádium choroby vyskytli v čase štúdie:

    • imunoglobulíny M označujú trvanie choroby;
    • IgA - pacient bol infikovaný pred viac ako 30 dňami;
    • IgG sa nachádza na „vrchole“ chorôb alebo v okamihu, keď liečba nedávno skončila.

    Počas štúdie zostávajú jamky na platni so záporným indikátorom bezfarebné a pozitívne jamky sú vyfarbené jasne žltou farbou. Ak sa farba pozitívnych jamiek nezhoduje s farbou kontroly, výsledok sa považuje za pochybný a je potrebné opätovné preskúmanie..

    Enzymaticky viazaný imunosorbentový test je prvým krokom v diagnostike HIV. Nie je možné vykonať analýzu okamžite po údajnej infekcii, je potrebné počkať do konca inkubačnej doby (od 14 dní do 6 mesiacov).

    V priebehu analýzy sa stanovia protilátky proti HIV-1 a HIV-2, hľadanie protilátok triedy G, ktoré sa zvyčajne objavia neskôr, a protilátok triedy A a M, ktoré sa dajú určiť v skorých štádiách (počas inkubačnej doby)..

    Po prijatí pozitívnych vzoriek by malo byť toto:

    • ak prvý test priniesol pozitívny výsledok, krv sa znova skontroluje iným laboratórnym asistentom;
    • opakovaný pozitívny výsledok zahŕňa opakovaný materiál,
    • pri opakovaní výsledku je pacientovi priradené imunoblotovanie.

    Konečný záver o prítomnosti infekcie HIV sa vydáva až po výsledku imunoblottingu.

    ELISA sa používa aj ako diagnostická štúdia tuberkulózy, ale aj keď má pacient dokonca protilátky na túto patológiu, nie vždy to potvrdzuje prítomnosť tuberkulózy, preto sa ELISA často používa ako objasňujúca technika alebo na diagnostiku skrytej extrapulmonálnej formy..

    Analýza ELISA je taká štúdia, ktorá vám umožní zistiť infekciu pacienta parazitmi a prvokmi, počas diagnostiky môžete dokonca určiť čas infekcie.

    Chlamydiacytomegalovírusparazity
    IgM - detekovaný 7 dní po infekcii,IgM sa zisťujú 30 až 45 dní po infekcii alebo počas reaktivácie infekcie počas 4 až 6 mesiacovŠtúdia stanovila IgME.

    IgG - chronické štádium invázie

    IgA - infekcia sa vyskytla pred viac ako 30 dňami
    IgG - invázia je v akútnej fáze
    IgG - potvrdzuje diagnózu a ukazuje účinnosť liečby

    Výhody a nevýhody analýzy

    IFA má mnoho výhod, čo vysvetľuje jeho popularitu medzi lekármi a pacientmi:

    • vysoká presnosť výsledku,
    • priaznivá cena,
    • rýchly výsledok,
    • identifikácia štádia choroby,
    • dynamika kontroly chorôb.

    Avšak, spolu s výhodami, je nevýhoda - v zriedkavých prípadoch je analýza nepravdivá pozitívna alebo nesprávna negatívna.

    Prečo môže byť výsledok nespoľahlivý

    Chyby v dôsledku toho môžu vzniknúť v dôsledku technických porušení, analýza je tiež nespoľahlivá u ľudí s niektorými chronickými chorobami (reumatoidný faktor), u ktorých je charakteristická produkcia špecifických protilátok..

    Konečný výsledok je tiež ovplyvnený použitím liekov pre pacientov a metabolických porúch. Z týchto dôvodov si pozitívny test na HIV a rakovinu vyžaduje opakované testovanie.

    Náklady na výskum

    Cena ELISA sa líši v závislosti od smeru diagnostiky (rubľov):

    • hepatitída 250 - 900;
    • vírusy - 250 - 1 000;
    • HIV - 250 - 350;
    • hlístové nákazy - 280 - 900;
    • syfilis -150 - 250;
    • plesňové infekcie 400-500.

    Enzymaticky viazaný imunosorbentový test je jednou z najúčinnejších metód na štúdium rôznych vírusových patológií, parazitárnych infekcií a onkologických patológií. Štúdiu, ako je ELISA, sa diagnóza značne uľahčuje. Túto analýzu by však pacient nemal interpretovať sám, dešifrovanie by sa mal zaoberať iba lekár..

    Zaslal: Bacio

    Dizajn článku: Lozinsky Oleg

    Je Dôležité Mať Na Pamäti Dystónia

    • Ischémia
      Zostáva odchýlka sínusového rytmu
      Odchýlka EOS vľavo: príčiny, diagnostika a liečbaZ tohto článku sa dozviete, čo je EOS, čo by malo byť normálne. Keď sa EOS odkloní trochu doľava - čo to znamená, aké choroby to môže naznačovať.
    • Pulz
      Riboxin (Inosine)
      Existujú kontraindikácie. Pred začatím sa poraďte s lekárom.Všetky antianginálne a metabolické lieky sú tu..Všetky lieky používané v kardiológii sú tu..Ak chcete položiť otázku alebo napísať recenziu o lieku (nezabudnite v texte správy uviesť názov lieku).

    O Nás

    ja Pnathrombocytopenaical (purpura trombocytopenica, lat. purpura magenta: doštičky [krvné doštičky] + grécka chudoba, pénia, synonymum: Werlhofova choroba, idiopatická trombocytopenická purpura)